小児特発性ネフローゼ症候群におけるSMPDL-3bの意義の解明

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2022年度は愛媛大学小児科におけるヒト腎臓糸球体上皮細胞の培養準備を行い、実験条件の最適化をおこなった。具体的には培地、培養器の条件を整え、前任地弘前大学より送付受け継いだ細胞を培養し、分化していることを確認した。また新たな方法として患者排泄尿中podocyte由来の核酸を抽出し、real time PCR法にて定量的に解析を行なうための予備実験を行なった。同意の得られた患者尿を速やかに遠心し、沈渣をの中からRNA抽出キットを用いてRNA抽出を行なった。本方法を用いることにより非侵襲的に目的遺伝子の発現状態を知ることができ、SMPDL3bの発現状態と疾患活動性の関連をより正確に知ることができる可能性がしめされた。また本方法を用いることにより小児特発性ネフローゼ症候群だけではなく、成人の糖尿病性腎症、IgA腎症、ループス腎炎など糸球体疾患の非侵襲的な尿中バイオマーカーの開発への可能性が示された。また同様の方法で患者リンパ球のSMPDL3b遺伝子発現を比較することで、ネフローゼ症候群の病態として全身の免疫異常か、腎局所の異常かあるいはその両者が関わっているのか、病態解明への手がかりとなりうることがわかった。現在、愛媛大学附属病院における患者さんの検体を用いるため学内倫理申請への諮問を経て、血液、尿、腎生検の検体を収集、保管をおこなっている。2021年4月に赴任以来、徐々に検体数が増えてきており、最終年度における解析にむけて準備を整えているところである。