骨細胞を基軸としたリン依存性オートファジー誘発型骨老化機構の解明

基于骨细胞阐明磷依赖性自噬诱导骨衰老机制

• 批准号: 19K10057
• 负责人: 佐々木 宗輝
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K10057/
• 关键词: リン; 老化; 骨細胞; オートファジー

本研究の目的は，以下の2点である．学術的問①：リンの血中濃度変化が骨基質のオートファジー機能に与える影響を明らかにした基礎研究は極めて少ないため不明．学術的問②：オートファジーが骨老化機構へ与える影響は全く分かっていない．従って，提起された研究課題の核心をなす学術的「問い①と②」に対する答えを見出すため，以下を本研究課題の目的とした．１）血中リン濃度の変化に対するオートファジー機能の変化を明らかにする.２）オートファジー機能に関連した骨老化経路を明らかにする.上記１）と２）を明らかにすることで，リンのオートファジー機能に対する影響が明らかになり，最終的には，オートファジー機能を介した骨老化機構が明らかになる.平成31年度から令和4年度までの研究を以下にまとめる．血中リン濃度の変化がマウス長管骨におけるオートファジー関連因子の局在が変化を招くことから，リンがオートファジーの機能的変化を惹起するものと考えられた．免疫組織化学においてリン調整食を与えた群では老化現象様の症状を認めた．次に，培養骨細胞を用いて免疫組織化学でリン濃度の変化に関連して局在が変化したオートファジー関連因子と老化因子の発現について定量解析を行った．令和3年度では，平成31年度に検索したリン濃度反応性オートファジー因子と令和2年度に検索したリン濃度反応性老化因子から変動の大きな因子を選択しsiRNAを作成した．さらに候補因子の経路検索を行った．令和4年度の研究では，令和3年に作成したリン濃度反応性老化候補因子のsiRNAを野生型マウスにトランスフェクションを行いリン調整食を与え解析を行った．その結果，候補因子の阻害後リン調整食を与えたマウスではトランスフェクションを行わずリン調整食を与えた野生型マウスと比較し，表現型に差があることが確認されたことから候補因子はリン濃度反応性老化因子の可能性が高いと考えられる．

The purpose of this study is to: Academic question ①: The change of blood concentration in bone matrix and its function are unknown. Academic question ②:. The core of this research topic is the academic question and answer, and the following are the objectives of this research topic: 1) the change of blood concentration, 2) the change of function, 3) the change of bone aging pathway, 4) the change of function, 5) the change of bone aging pathway. The above notes 1) and 2) indicate the influence of the function on the bone aging mechanism. Heisei 31st year order and 4th year research The change of blood concentration is caused by the change of blood concentration. Immunohistochemistry is used to adjust the symptoms of aging. In addition, the quantitative analysis of the expression of correlation factors and aging factors in cultured bone cells was carried out by immunohistochemistry. In the third year, the siRNA was selected for the first time in the third year, and the siRNA was selected for the second year in the third year in the third year. The candidate factor and the route search are performed. In the fourth year of the study, the concentration of anti-aging candidate factors in wild type siRNA was determined. As a result, the candidate factor has a high probability of resistance to aging compared with the wild type.