骨細胞を基軸としたリン依存性オートファジー誘発型骨老化機構の解明

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本研究の目的は，以下の2点である．学術的問①：リンの血中濃度変化が骨基質のオートファジー機能に与える影響を明らかにした基礎研究は極めて少ないため不明．学術的問②：オートファジーが骨老化機構へ与える影響は全く分かっていない．従って，提起された研究課題の核心をなす学術的「問い①と②」に対する答えを見出すため，以下を本研究課題の目的とした．１）血中リン濃度の変化に対するオートファジー機能の変化を明らかにする.２）オートファジー機能に関連した骨老化経路を明らかにする.上記１）と２）を明らかにすることで，リンのオートファジー機能に対する影響が明らかになり，最終的には，オートファジー機能を介した骨老化機構が明らかになる.平成31年度から令和4年度までの研究を以下にまとめる．血中リン濃度の変化がマウス長管骨におけるオートファジー関連因子の局在が変化を招くことから，リンがオートファジーの機能的変化を惹起するものと考えられた．免疫組織化学においてリン調整食を与えた群では老化現象様の症状を認めた．次に，培養骨細胞を用いて免疫組織化学でリン濃度の変化に関連して局在が変化したオートファジー関連因子と老化因子の発現について定量解析を行った．令和3年度では，平成31年度に検索したリン濃度反応性オートファジー因子と令和2年度に検索したリン濃度反応性老化因子から変動の大きな因子を選択しsiRNAを作成した．さらに候補因子の経路検索を行った．令和4年度の研究では，令和3年に作成したリン濃度反応性老化候補因子のsiRNAを野生型マウスにトランスフェクションを行いリン調整食を与え解析を行った．その結果，候補因子の阻害後リン調整食を与えたマウスではトランスフェクションを行わずリン調整食を与えた野生型マウスと比較し，表現型に差があることが確認されたことから候補因子はリン濃度反応性老化因子の可能性が高いと考えられる．