in vivo analysis of the occlusal force-responsive tissue stem cells in periodontal ligament

牙周膜中咬合力响应组织干细胞的体内分析

• 批准号: 19K10200
• 负责人: 加来 咲子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K10200/
• 关键词: 歯根膜; 細胞追跡法; 組織幹細胞; 細胞系譜解析; 細胞追跡; 咬合力

咬合機能の維持・回復には歯根膜の恒常性維持機構の理解が不可欠である．我々は歯根膜組織では力学的刺激に対する細胞応答は一様でなく，歯根膜細胞は部位特異的な細胞集団から構成されていることを明らかにしてきた．歯根膜組織幹細胞は咬合力による組織応答に対する細胞供給源として働いていると考えられるが，局在を含めたその詳細は不明である．そこで本研究で細胞標識とその長期追跡により，咬合力に応答する歯根膜組織幹細胞を同定することを目的とした．過剰咬合条件下での細胞周期動態を解析することにより，細胞の生み出される場，すなわち組織幹細胞の局在を明らかにする事ができると考え，組織中のすべての細胞を個別に標識する事が可能なRGBow/UBC-CreERT2マウス(以下RGBowマウス)を用いることとした．RGBowマウスは薬剤投与時に，全ての細胞をランダムに異なる蛍光タンパクで標識することが可能な遺伝子改変マウスである．その原理は，ゲノムに組み込まれた ３種の蛍光タンパクを連続的にコードしたコンストラクトが，薬剤（Tamoxifen)依存的にランダムに組み換えを起こすことで，個々の細胞が何れかの蛍光タンパクを発現するようになる．この変化はゲノムDNA上で不可逆的に生じるため，幹細胞から増殖/分化した娘細胞は母細胞と同じ蛍光の発現パターンを示し，細胞クラスターを形成する．この結果，個々の組織幹細胞に由来する娘細胞群を長期に追跡することが可能となる．初年度の解析により細胞標識の条件はほぼ確立したものの，次年度はコロナウイルス感染拡大予防の観点から，所属研究機関の動物実験施設におけるマウスの繁殖規模を大幅に縮小せざるをえなかった．

The maintenance and recovery of occlusal function and the understanding of the mechanism of root membrane constancy are indispensable. The root membrane tissue is stimulated by mechanical forces, and the root membrane cells are formed in a site-specific manner. The root membrane tissue stem cell bite force is not clear. The aim of this study is to identify and track the root membrane stem cells for a long time. Cell cycle dynamics analysis under occlusal conditions, cell growth and development, tissue stem cell status, and individual identification of tissue stem cells (The following RGBow) The principle is that three kinds of light sources must be grouped together, and the light source must be connected to the light source. The light source must be connected to the light source, and the light source must be connected to the light source. This transformation is irreversible on DNA. Stem cells proliferate and differentiate. Mother cells develop and display light. The origin of these stem cells was traced over a long period. In the first year, the conditions for cell identification were established, and in the second year, the breeding scale of the animals in the affiliated research institutions was greatly reduced.

项目成果

Long-term lineage tracing of the periodontal ligament cells in vivo.

体内牙周膜细胞的长期谱系追踪。

• 发表时间: 2020
• 作者: Kaku M;Mizukoshi M;Kitami K;Rocabado JMR;Kaku S;Maeda T;Saito I;Uoshima K
• 通讯作者: Uoshima K