動物モデルを用いた気管支敗血症菌感染による病態発生機序の解析

利用动物模型分析支气管败血杆菌感染的发病机制

基本信息

  • 批准号:
    18K15146
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 财政年份:
    2018
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2018-04-01 至 2019-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ボルデテラ属に分類される代表的な病原因子である百日咳菌、パラ百日咳菌および気管支敗血症菌は、いずれも哺乳動物の呼吸器に感染して特徴的な咳嗽発作(咳発作)を引き起こすが、その発症機構は全く明らかになっていない。そこで本研究では、宿主特異性の広い気管支敗血症菌のラットへの感染系を用い、咳原因因子の同定および発症機構の解明を目指した。前年度までにラットを用いて咳発作を解析し、気管支敗血症菌の咳原因因子は抗シグマ因子をコードするbspRの下流で転写制御を受けて発現することを明らかにしている。また、気管支敗血症菌のBvg+相(病原性)の菌体破砕液をラットに投与すると咳発作が起こるのに対し、Bvg-相(非病原性)菌体破砕液投与では咳発作は起こらない。以上の知見から、Bvg+相で発現し、かつBvg-相でほとんど発現せず、またBspRによって発現レベルに影響を受ける因子を咳原因因子の候補として探索を試みた。BspR欠損株菌体破砕液の投与量を変更し咳発作を解析したところ、野生株と同様の咳発作の推移を示した。このことから咳因子は感染時のみBspRの制御を受けることが示唆された。そこで、野生株とbspR欠損株を比較したRNA-seqと、Bvg+相とBvg-相を比較したマイクロアレイを組み合わせて解析し、Bvg+相で発現し、かつBvg-相でほとんど発現せず、またBspRによって発現レベルに影響を受ける81の候補遺伝子を選出した。更に候補遺伝子を絞り込むため、ラット気管感染時における野生株およびbspR欠損株についてin vivo RNA-seqに供することを目指した。現在RNAサンプルの抽出方法について検討中である。今後は野生株およびbspR欠損株についてin vivo RNA-seqを行うこと、また分画した菌体破砕液を用いた咳原因因子の探索を行う予定である。
The pathogenic agents represented by the genus are pertussis bacteria, pertussis bacteria, and hematomas, and the cough response characteristic of respiratory infections in mammals is the cause and mechanism of the disease. This study aims to clarify the role of host-specific pathogens in the identification of infection mechanisms, causative factors, and mechanisms of pathogenesis. In the past year, we have analyzed the cause factors of cough caused by vascular poisoning bacteria, and we have analyzed the cause factors of cough caused by vascular poisoning bacteria. Bvg+ phase (pathogenic) bacterial disruption solution of pathogenic bacteria The above findings are: Bvg+ phase discovery, Bvg-phase discovery, BspR discovery, influence factors, candidate factors, exploration, etc. The change of dosage and development of BspR strain was analyzed and the change of development of BspR strain and wild strain was shown. When the infection occurs, the BspR is controlled. 81 candidate genes were selected for comparison of RNA-seq, Bvg+ phase and Bvg-phase between wild and bspR deficient plants, analysis of Bvg+ phase, detection of Bvg-phase, detection of BspR and detection of BspR. In addition, the candidate gene was detected in vivo RNA-seq when infected with wild strains and bspR defective strains. RNA extraction methods are now available for investigation. In the future, wild plants with defective bspR will be investigated in vivo RNA-seq, and the causes of cough will be explored in the future.

项目成果

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