HSP90とがん幹細胞様細胞マーカーCD１３３の相互作用とがん治療抵抗性との関係

HSP90与癌症干细胞样细胞标志物CD133之间的相互作用及其与癌症治疗耐药的关系

• 批准号: 18K15638
• 负责人: 藤井 義大
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Nihon institute of Medical Science (2022)Ibaraki Prefectural University of Health Science (2018-2021)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K15638/
• 关键词: cancer stem cell; CD133; HSP90阻害剤; がん幹細胞; HSP90; Hsp90阻害剤

本研究は、放射線抵抗性細胞（CD133陽性細胞）におけるHSP90阻害剤の有効性を明らかにし、その作用機序を解明することを目的としている。CD133陽性細胞に対するHSP90阻害剤の有効性は、コロニー形成法により細胞の生存率が非常に低下することで確認している。HSP90の阻害剤は複数種類を試しており、１種類のみの特異的なものとは考えにくい。さらに追加でTAS-116でも実験を行っている。また、蛍光免疫染色法によりCD133タンパク質とHSP90タンパク質の細胞内での共局在の可能性も確認できたので、２つのタンパク質の細胞内での相互作用を示唆する実験データを得ることができた。そこで、２つのタンパク質の相互作用の有無の確証を得るために、免疫沈降法によりCD133タンパク質とHSP90タンパク質との相互作用の有無を確認中である。以前までに、相互作用は確認できておらず、実験条件等を検討中である。また、CD133とHSP90との関係が直接的なものなのか間接的なものなのかを確認する実験の一つとして、siRNAをもちいてCD133もしくはHSP90をノックダウンした細胞においてHSP90阻害剤の効果（細胞の生存率）が変化するかどうかも確認中である。上記のTAS-116によるCD133陽性細胞への効果を調べたところ、細胞生存率の低下によってその効果が追加で確認できたが、現在再現性を確認し、その信ぴょう性を確認中である。また、現在のところ免疫沈降法によるCD133とHSP90との相互作用の有無を確認することができていない。

This study aims to clarify the role and mechanism of HSP90 inhibitors in radioresistant cells (CD133-positive cells). It is confirmed that the survival rate of CD133 positive cells is very low due to the effectiveness of HSP90 inhibitors and the formation of HSP90. HSP90 has a number of different types of inhibitors, one type and one specific inhibitor. TAS-116 was added today. CD133 protein and HSP90 protein were detected by light immunostaining to confirm the possibility of intracellular interaction between CD133 and HSP90 protein. The existence or absence of interaction between CD133 and HSP90 is confirmed by immunosedimentation method. In the past, interaction was confirmed, and conditions were discussed. The relationship between CD133 and HSP90 is confirmed by direct and indirect methods. siRNA is used to detect CD133 and HSP90 in cells. The effect of HSP90 on cell survival is confirmed by siRNA. Note that TAS-116 cells have been found to be sensitive to changes in cell viability and to be sensitive to changes in cell viability. The interaction between CD133 and HSP90 was confirmed by immunoprecipitation.