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Development of a novel screening system for PPI-targeted drugs using cutinase fusion strategy

利用角质酶融合策略开发 PPI 靶向药物的新型筛选系统

基本信息

批准号：
24651260
负责人：
TAKAGI Junichi
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

A wide variety of methods have been developed to detect, analyze, and quantify protein interactions, including SPR, ITC, co-precipitation, affinity chromatography, ultracentrifugation, NMR, mass spectrometry, and ELISAs in vitro. While these methods are widely used to identify protein function, they quickly reach their limits when it comes to addressing the intricate, dynamic mechanics of a biological pathway. In contrast, cell-based PPIs assays are appropriate for wider applications. However, these assays have different limitations such as the low-contrast imaging, using fixed-cells, high-cost and a lot of step experiments. In this study, we have established the PPI assay system which observes the site-specifically labeled target proteins with a binding partner under physiological context in live cells.

已开发了多种方法来检测、分析和定量蛋白质相互作用，包括SPR、ITC、共沉淀法、亲和层析、超速离心法、核磁共振、质谱仪和ELISA。虽然这些方法被广泛用于识别蛋白质的功能，但当涉及到生物途径的复杂、动态机制时，它们很快就达到了极限。相比之下，基于细胞的PPI分析适用于更广泛的应用。但是，这些检测方法都有不同的局限性，如成像对比度低、使用固定细胞、成本高、需要进行大量的阶梯式实验。在这项研究中，我们建立了PPI检测系统，该系统在活细胞中观察在生理环境下与结合伙伴结合的位点特异性标记的靶蛋白。

项目成果

期刊论文数量（37）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

免疫学研究における構造生物学のインパクト

结构生物学对免疫学研究的影响

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
0
作者：
北郷悠;高木淳一;高木淳一;Takagi J;高木淳一;松永幸子;藤井勇樹;Takagi J;Matsunaga Y;松永　幸子;Takagi J;高木淳一
通讯作者：
高木淳一

神経ガイダンス因子セマフォリン3AのC末端におけるニューロピリン受容体との結合モチーフの同定

神经引导因子信号蛋白 3A C 末端神经毡蛋白受体结合基序的鉴定

DOI：
发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
0
作者：
北郷悠;高木淳一;高木淳一;Takagi J;高木淳一;松永幸子
通讯作者：
松永幸子

Crystal structure of Enpp1, an extracellular glycoprotein involved in bone mineralization and insulin signaling

DOI：
10.1073/pnas.1208017109
发表时间：
2012-10-16
期刊：
PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
影响因子：
11.1
作者：
Kato, Kazuki;Nishimasu, Hiroshi;Nureki, Osamu
通讯作者：
Nureki, Osamu

セマフォリン関連分子群の立体構造

信号蛋白相关分子的三维结构