Creation of Novel Functional Protein by Self-hydroxylation

通过自羟基化创建新型功能蛋白

• 批准号: 24655153
• 负责人: FUJIEDA Nobutaka
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24655153/
• 关键词: 非ヘム鉄酵素; 酸化的自己修飾; 翻訳後化学修飾; ビルトイン補酵素; 人工金属酵素; 金属タンパク質; 翻訳後修飾; 非天然アミノ酸; 自己水酸化反応

Recently, many self-hydroxylation reactions have reported, which occurred of aromatic amino acids lying close to mononuclear and dinuclear iron and copper binding site. In this study, we utilized cupin family protein bearing three or four histidine binding motif (3-His or 4-His motif) as metal binding scaffold. In the mutant introduced one tyrosine into the location of Ile49 or Trp56, non-natural occurring unusual spectral species around 800 nm have been found. Thus, the modification method presented in this study is very powerful to construct new functional protein for novel devices of bioelectronics and artificial metalloenzyme to be able to catalyze multielectron transfer reactions.

近年来，报道了许多芳香族氨基酸的自羟化反应，芳香族氨基酸位于单核和双核铁、铜结合部位附近。在本研究中，我们使用含有三个或四个组氨酸结合基序(3-His或4-His基序)的Cupin家族蛋白作为金属结合支架。在将一种酪氨酸引入Ile49或Trp56位置的突变体中，发现了800 nm左右的非自然存在的异常光谱物种。因此，本研究提出的修饰方法对于构建新型生物电子器件和人工金属酶催化多电子转移反应的新型功能蛋白具有重要意义。

项目成果

活性部位周辺の自己水酸化反応を活用した新規金属タンパク質の調製

利用活性位点周围的自羟基化制备新型金属蛋白

• 发表时间: 2013
• 作者: 谷口勇希;信重和紀;藤枝伸宇;伊東忍
• 通讯作者: 伊東忍

4つのヒスチジンからなる単核鉄中心をもつタンパク質の分光学的特性および反応性の評価

评估具有由四个组氨酸组成的单核铁中心的蛋白质的光谱特性和反应性

• 发表时间: 2013
• 作者: 石濱謙一;藤枝伸宇;伊東忍
• 通讯作者: 伊東忍

バレル状タンパク質における金属結合サイト近傍の自己水酸化反応

桶状蛋白质金属结合位点附近的自羟基化

• 发表时间: 2013
• 作者: 信重和紀;石濱謙一;藤枝伸宇;伊東忍
• 通讯作者: 伊東忍

4つのヒスチジンが配位した単核鉄含有タンパク質の特性評価

由四个组氨酸协调的单核含铁蛋白的表征

• 发表时间: 2013
• 作者: 谷口勇希;藤枝伸宇;伊東忍
• 通讯作者: 伊東忍

Crystal Structures of Copper-depleted and Copper-bound Fungal Pro-tyrosinase INSIGHTS INTO ENDOGENOUS CYSTEINE-DEPENDENT COPPER INCORPORATION

• DOI: 10.1074/jbc.m113.477612
• 发表时间: 2013-07-26
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Fujieda, Nobutaka;Yabuta, Shintaro;Itoh, Shinobu
• 通讯作者: Itoh, Shinobu