evelopment of temperature responsible magnetic nanoparticles for targeting cancer cells

开发用于靶向癌细胞的温度响应磁性纳米颗粒

• 批准号: 23656528
• 负责人: KONDO Akihiko
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23656528/
• 关键词: ナノ粒子; 固定化; タンパク質; タンパク質固定化; 磁性粒子; 磁性ナノ粒子; ガン治療; DDS; イメージング

A microparticle surface was designed by the unique method incorporating streptavidin-biotin affinity and sortase A (SrtA)-catalyzed transpeptidation. Leucine-proline-glutamate-threonine-glycine-tagged streptavidin (Stav-LPETG) was immobilized on the surface using streptavidin-biotin affinity, and GGGGG-tagged red fluorescent protein (Gly5-RFP) was conjugated with SrtA. Biotinylated fluorescein isothiocyanate (biotin-FITC) was then bound to residual biotin-binding sites in Stav-LPETG. The resulting particles had RFP and FITC immobilized on the surface via Stav-LPETG, and RFP- and FITC-associated fluorescence was observed using fluorescence microscopy. Finally, GGG-tagged glucose oxidase and biotinylated horseradish peroxidase were immobilized on the microparticle surface, resulting in a functional particle capable of detecting glucose. This particle can be repeatedly used and is more sensitive in detecting glucose than particles prepared using chemical modification. Our method provides a simple strategy for site-specific coimmobilization on molecular surfaces and expands the use of protein hybrid devices.

通过结合链霉亲和素-生物素亲和性和分选酶A（SrtA）催化的转肽作用的独特方法设计微粒表面。使用链霉亲和素-生物素亲和性将亮氨酸-脯氨酸-谷氨酸-苏氨酸-甘氨酸标记的链霉亲和素（Stav-LPETG）固定在表面上，并将GGGGG标记的红色荧光蛋白（Gly 5-RFP）与SrtA缀合。然后将生物素化的异硫氰酸荧光素（生物素-FITC）与Stav-LPETG中的残留生物素结合位点结合。所得颗粒具有通过Stav-LPETG固定在表面上的RFP和FITC，并且使用荧光显微镜观察RFP和FITC相关的荧光。最后，GGG标记的葡萄糖氧化酶和生物素化辣根过氧化物酶被固定在微粒表面上，产生能够检测葡萄糖的功能性颗粒。该颗粒可以重复使用，并且在检测葡萄糖方面比使用化学修饰制备的颗粒更灵敏。我们的方法提供了一个简单的策略，位点特异性的分子表面上的共固定，并扩大了蛋白质杂交装置的使用。

项目成果

Sortase A-Catalyzed Site-Specific Coimmobilization on Microparticles via Streptavidin

• DOI: 10.1021/la2047933
• 发表时间: 2012-02-21
• 期刊: LANGMUIR
• 影响因子: 3.9
• 作者: Matsumoto, Takuya;Tanaka, Tsutomu;Kondo, Akihiko
• 通讯作者: Kondo, Akihiko

Sortase A を用いた酵素配向固定化微粒子の作製

使用 Sortase A 制备酶定向固定化微粒

• 发表时间: 2013
• 作者: Guirimand;G.;Higashikubo;R.;Wakabayashi;T.;Yasumoto;S.;Mizutani;M.;Sugimoto;Y.;Seki;H.;Muranaka;T.;Okazawa;A;間部 悟ら;大橋広行・阿部亮二・高木広明・上田宏;秦 悠斗 ・松本 拓也 ・田中 勉・近藤 昭彦
• 通讯作者: 秦 悠斗 ・松本 拓也 ・田中 勉・近藤 昭彦

ストレプトアビジンを介したタンパク質の高配向同時固定化技術の開発

通过链霉亲和素开发蛋白质高度定向共固定技术

• 发表时间: 2012
• 作者: Guirimand;G.;Higashikubo;R.;Wakabayashi;T.;Yasumoto;S.;Mizutani;M.;Sugimoto;Y.;Seki;H.;Muranaka;T.;Okazawa;A;中林 秀人ら;松本 拓也・秦 悠斗・田中 勉・近藤 昭彦
• 通讯作者: 松本 拓也・秦 悠斗・田中 勉・近藤 昭彦

Streptavidin を用いた部位特異的な異種タンパク質同時固定化技術の開発

使用链霉亲和素开发位点特异性异源蛋白共固定技术

• 发表时间: 2012
• 作者: 松本拓也;田中勉;近藤昭彦
• 通讯作者: 近藤昭彦

Sortase A-catalyzed design of multi-labeled macromolecular via recombinant streptavidin

分选酶 A 催化重组链霉亲和素设计多标记大分子

• 发表时间: 2011
• 作者: Matsumoto T;Tanaka T;Kondo A.
• 通讯作者: Kondo A.