ATP amplification reaction in pico-liter chamber and its application to bacteria detection.

皮升室中ATP扩增反应及其在细菌检测中的应用

• 批准号: 23656529
• 负责人: KURODA Akio
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23656529/
• 关键词: ルシフェラーゼ; 迅速計測; 微生物; ATP; ATP増幅反応

To rapidly measure the number of microorganisms in solution, we attempted to use a capillary array, a circular glass plate with fine pore regularly arranged in two-dimensional array. After applying a given amount of sufficiently diluted solution to the capillary array containing both ATP-extracting and bioluminescence reagents, the number of microorganisms can be easily estimated from the proportion of luminescent pores. In this research, we immobilized luciferase on micro-beads (approximately 2.8 μm in diameter) that could serve as a model of microorganisms in solution. Using the micro-beads, we determined the concentration of ATP needed to generate detectable level of luminescence. We concluded that the rapid measurement of microorganisms would require further improvement of ATP amplification technology and the use of high luminescence luciferase.

为了快速测量溶液中微生物的数量，我们尝试使用毛细管阵列，一个圆形的玻璃板与细孔有规律地排列在二维阵列。在将给定量的充分稀释的溶液施加到含有ATP提取试剂和生物发光试剂的毛细管阵列之后，可以容易地从发光孔的比例估计微生物的数量。在本研究中，我们将荧光素酶固定在微珠（直径约2.8 μm）上，可以作为溶液中微生物的模型。使用微珠，我们确定了产生可检测水平的发光所需的ATP浓度。我们的结论是，微生物的快速测量将需要进一步改进ATP扩增技术和使用高发光荧光素酶。

项目成果

高輝度ルシフェラーゼの開発と医療診断応用への可能性

高强度荧光素酶的开发及其在医学诊断应用中的潜力

• 发表时间: 2013
• 作者: 黒田章夫;廣田隆一;黒田章夫
• 通讯作者: 黒田章夫

リンのバイオテクノロジー

林生物科技

• 发表时间: 2012
• 作者: 黒田章夫;廣田隆一;黒田章夫;黒田章夫
• 通讯作者: 黒田章夫

微量 ATP の増幅技術

微量ATP扩增技术

還元型リン酸のバイオ利用のための新たな挑戦

还原型磷酸生物利用的新挑战

• 发表时间: 2011
• 作者: 黒田章夫;廣田隆一
• 通讯作者: 廣田隆一

微量ATPの増幅技術

微量ATP扩增技术