酵素プロファイルから紐解く病斑の「かたち」を決める分子機構

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本研究は、植物病原糸状菌、特にダイズの病原糸状菌を対象に、病斑形成に関わるような遺伝子をゲノム中から探索することを目的としている。今年度は、ダイズ紫斑病菌のゲノム中から、病原性に関与することが推定される遺伝子群を選抜し、その解析を進めた。前年度までに、ダイズ紫斑病菌MAFF 305040株のゲノム解析を実施し、完成度の高いゲノム配列が得られている。今年度はさらに、よりダイズへの病原性が強いと考えられるダイズ紫斑病菌の菌株のゲノム配列を解析した。病原性が強い菌株を研究に利用することで、ダイズに対する病原性に寄与する遺伝子の探索、および、ダイズへの接種試験等に基づいた機能の解析が効率よく進むと考えられる。新たに取得した菌株のゲノム配列からコーディング領域を推定し、それらの中から、植物に対する病原性に関与することが推定される遺伝子（植物組織分解酵素の遺伝子として予測された配列など）を選抜した。さらに、ダイズに紫斑病菌を接種し、経時的に接種済みの葉を回収、RNAを抽出した。このサンプルをトランスクリプトーム解析に供し、ダイズ紫斑病菌が宿主感染時に発現している遺伝子の情報を収集した。ダイズ紫斑病菌の形質転換方法に関しては、アグロバクテリウムを利用してダイズ紫斑病菌にDNAを導入する方法、もしくは、ダイズ紫斑病菌のプロトプラストを取得してDNAを導入する方法を検討している。今後、作出した遺伝子破壊株等はダイズへの接種試験に供し、ゲノム解析から見出した遺伝子の病原性に関連する機能の解析を進める。