权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

The mechanism of proton channel activation by the molecular interaction with lipids

与脂质分子相互作用激活质子通道的机制

基本信息

批准号：
21K15344
负责人：
稲田壮峰
金额：
$ 3万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、白血球膜に産生されるプロトンチャネルHv1による外的刺激センシング機構解明の一環として、脂質（脂肪酸）分子により活性化されるメカニズムを解明することを目的としている。当期間では、①電気生理学的手法（パッチクランプ）によるチャネルの機能解析、②表面プラズモン共鳴（SPR）を利用した分子間相互作用解析を行った。電気生理学的手法では、生細胞に発現させたHv1に対して各種脂質懸濁液を添加することで、チャネルによるプロトン透過機能を検討した。この結果、活性化不飽和度の高い脂肪酸がHv1を効果的に活性化させることが示唆された。次いで行った分子間相互作用解析では、不飽和脂肪酸分子がHv１に直接結合することが示されたとともに、分子種特有の親和性を有することが考えられた。このように、双方の手法によって、特定の脂肪酸がHv１機能制御に貢献することが示されるデータが得られつつあった一方、いずれの解析についてもデータにばらつきが大きく現れ、十分な再現性を取得するに至らなかった。今後、各種分光法等による分子間相互作用の構造解析を起点として、脂質分子によるチャネル活性化メカニズムの詳細が解明されることが望ましい。

This study aims to elucidate the mechanism of leukocyte membrane production and activation of lipid (fatty acid) molecules by stimulating Hv1. During this period,(1) electrophysiological methods (2) surface resonance (SPR) and (3) molecular interaction analysis were used. The method of electrophysiology is to investigate the function of Hv1 in various lipid suspensions. As a result, the activation of fatty acids with high unsaturation and Hv1 effect was reduced. The second analysis of intermolecular interactions shows that unsaturated fatty acid molecules bind directly to Hv1, and that there is a unique affinity for molecular species. The method of both sides, the contribution of specific fatty acids to Hv1 function control, and the analysis of these fatty acids are shown in the following ways: In the future, various spectroscopic methods will be used to analyze the starting point of molecular interaction, and the detailed solution of lipid molecular activation will be expected.