3D培養腎細胞を用いた腎臓病早期診断法の開発と新規治療薬探索

慢性腎臓病（CKD）は『新たな国民病』と言われている。しかしながら、一部の腎炎を除き障害を受けた腎臓を治すための治療薬は開発されていない。また、腎臓病は自覚症状に乏しいため、多くの患者がCKDへと進行してしまう。こうした観点から、より早期の段階で腎炎診断を可能とするバイオマーカーの樹立が求められている。本研究では、２次元培養より生体腎に近い形質を有する糸球体様および尿細管様スフェロイドを用い各腎臓病を模倣するモデル培養系を作製する。作成したモデル培養系をRNA-sequenceにて解析を行い、早期のバイオマーカー候補の探索および、候補分子の変動を各病因のモデルマウスにて検討する。現在行われている腎症の確定診断は腎生検であり、患者への負担が大きく、非侵襲的な診断方法の確立が求められている。そこで、候補分子中から尿中にて抽出可能な分子を探索し、新規臨床検査方法の開発を目指す。樹立したスフェロイドへの刺激添加による疾患モデル培養系が、生体内での反応と一致しているかを検討するため、本年度はスフェロイドからタンパクおよびmRNAの抽出および培養上清の回収し、細胞障害マーカー（Kim-1、NGAL）の発現増加レベルの検討を行った。また、スフェロイド培養上清中および腎臓病患者尿よりエクソソームを抽出し、エクソソーム内に含まれる分子について解析中である。また、新規腎臓病治療薬の候補薬探索に向け、スフェロイドの大量培養方法についての検討を行った。

慢性腎臓病（CKD）は『新たな国民病』と言われている。しかしながら、一部の腎炎を除き障害を受けた腎臓を治すための治療薬は開発されていない。また、腎臓病は自覚症状に乏しいため、多くの患者がCKDへと進行してしまう。こうした観点から、より早期の段階で腎炎診断を可能とするバイオマーカーの樹立が求められている。本研究では、２次元培養より生体腎に近い形質を有する糸球体様および尿細管様スフェロイドを用い各腎臓病を模倣するモデル培養系を作製する。作成したモデル培養系をRNA-sequenceにて解析を行い、早期のバイオマーカー候補の探索および、候補分子の変動を各病因のモデルマウスにて検討する。現在行われている腎症の確定診断は腎生検であり、患者への負担が大きく、非侵襲的な診断方法の確立が求められている。そこで、候補分子中から尿中にて抽出可能な分子を探索し、新規臨床検査方法の開発を目指す。樹立したスフェロイドへの刺激添加による疾患モデル培養系が、生体内での反応と一致しているかを検討するため、本年度はスフェロイドからタンパクおよびmRNAの抽出および培養上清の回収し、細胞障害マーカー（Kim-1、NGAL）の発現増加レベルの検討を行った。また、スフェロイド培養上清中および腎臓病患者尿よりエクソソームを抽出し、エクソソーム内に含まれる分子について解析中である。また、新規腎臓病治療薬の候補薬探索に向け、スフェロイドの大量培養方法についての検討を行った。