The interaction between NK cells and neutrophil extracellular traps in antitumor immunity

前年度はヒト白血病細胞株HL-60をAtRA (All-trans retinoic acid)で分化誘導した好中球様細胞株や、健常人ボランティアから採取した末梢血好中球(peripheral blood neutrophil: PBN)にPMA(phorbol myristate acetate)刺激を行い、好中球細胞外トラップ(neutrophil extracellular traps: NETs)の安定した生成が可能となった。当該年度は主に、NK細胞機能の評価を行った。NK細胞株KHYG1や、末梢血単核球(Peripheral Blood Mononuclear Cells: PBMC)を用い、パーフォリン・グランザイム・DNAM1・TIGITなどの活性化マーカー測定や、標的細胞としてK562細胞株を使用し細胞傷害活性の確認を行った。また、動物モデルも同時に進めており、C57BL/6マウスの足底に悪性黒色腫細胞株（B16BL6）を移植した後に、下肢を切断することで肺への自然転移を起こるモデルを使用している。自然転移に対するNETsの関連を検討するため、NETs形成を阻害するDNAseⅠ・クロロキンを投与し、肺でのNETs形成の差異や、肺転移個数の変化を検討している。また、膵癌細胞株（Pan02）の膵臓への同所移植による肝転移モデルも作成し、同様のNETs阻害実験を開始している。

前年度はヒト白血病細胞株HL-60をAtRA (All-trans retinoic acid)で分化誘導した好中球様細胞株や、健常人ボランティアから採取した末梢血好中球(peripheral blood neutrophil: PBN)にPMA(phorbol myristate acetate)刺激を行い、好中球細胞外トラップ(neutrophil extracellular traps: NETs)の安定した生成が可能となった。当該年度は主に、NK細胞機能の評価を行った。NK細胞株KHYG1や、末梢血単核球(Peripheral Blood Mononuclear Cells: PBMC)を用い、パーフォリン・グランザイム・DNAM1・TIGITなどの活性化マーカー測定や、標的細胞としてK562細胞株を使用し細胞傷害活性の確認を行った。また、動物モデルも同時に進めており、C57BL/6マウスの足底に悪性黒色腫細胞株（B16BL6）を移植した後に、下肢を切断することで肺への自然転移を起こるモデルを使用している。自然転移に対するNETsの関連を検討するため、NETs形成を阻害するDNAseⅠ・クロロキンを投与し、肺でのNETs形成の差異や、肺転移個数の変化を検討している。また、膵癌細胞株（Pan02）の膵臓への同所移植による肝転移モデルも作成し、同様のNETs阻害実験を開始している。