膵癌におけるmiRNA解析から導かれる病態解明

EUS-FNAで得られた検体で膵癌の病態解明に有用なmiRNAを検出することが本研究の目的である。対象は、EUS-FNAで確定診断が得られた切除不能膵癌５１例（男性２１例・女性３０例：平均年齢６９．５歳）Stage分類はStageⅣが３０例（５９％）Stage Ⅱ/Ⅲが２１例（４１％）であった。FNA検体からmicroRNA を回収し(Qiagen 社・miRNeasy mini Kit,本課題研究で申請).これをアレイ用のサンプルとした。アレイ(Toray 社. human miRNA Oligo chip, version 20, 2555 種類のmicroRNA を搭載.)に，標識（Exiqon 社. miRCURY Hy5 Power Labeling Kit）したサンプルをハイブリダイゼーション後、アレイ用スキャナー(3D-GeneScanner 3000, Toray 社)でスキャニングを行った。その後，解析ソフトウエアー3D-Geneextraction software version 1.2 (Toray 社) を用いて得られたイメージ画像(TIFF 画像，16bit 形式)から，各スポットにおける蛍光強度値の定量化を行い、シグナル値を算出し、抗がん剤治療の効果の違いによるmiRNAの出現の差異を評価した。その結果、hsa-miR-192-5pとhsa-miR-1260bが同定された。

EUS-FNAで得られた検体で膵癌の病態解明に有用なmiRNAを検出することが本研究の目的である。対象は、EUS-FNAで確定診断が得られた切除不能膵癌５１例（男性２１例・女性３０例：平均年齢６９．５歳）Stage分類はStageⅣが３０例（５９％）Stage Ⅱ/Ⅲが２１例（４１％）であった。FNA検体からmicroRNA を回収し(Qiagen 社・miRNeasy mini Kit,本課題研究で申請).これをアレイ用のサンプルとした。アレイ(Toray 社. human miRNA Oligo chip, version 20, 2555 種類のmicroRNA を搭載.)に，標識（Exiqon 社. miRCURY Hy5 Power Labeling Kit）したサンプルをハイブリダイゼーション後、アレイ用スキャナー(3D-GeneScanner 3000, Toray 社)でスキャニングを行った。その後，解析ソフトウエアー3D-Geneextraction software version 1.2 (Toray 社) を用いて得られたイメージ画像(TIFF 画像，16bit 形式)から，各スポットにおける蛍光強度値の定量化を行い、シグナル値を算出し、抗がん剤治療の効果の違いによるmiRNAの出現の差異を評価した。その結果、hsa-miR-192-5pとhsa-miR-1260bが同定された。