免疫応答と細胞間相互作用に注目した急性肝不全の病態解明

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前年度の研究結果からconcanavalin A投与モデルマウスは組織像や炎症性サイトカインの上昇、肝逸脱酵素（AST、ALT、LDH)の上昇の様式等が実臨床の急性肝不全症例における類洞血流障害型に類似していることが判明したため、類洞血流障害型の急性肝不全の病態解明を目的にconcanavalin A投与モデルマウスにおいて解析を進めることとした。Concanavalin A投与前、投与１時間後、投与３時間後の肝臓から非実質細胞を分取し一細胞遺伝子発現解析を行った。それぞれのタイムポイントにおいて遺伝子発現プロファイルの異なる複数の細胞集団を同定できた。急性肝不全において既報にて重要性が指摘されているIFNγとTNFαの発現細胞を一細胞遺伝子発現解析で確認したところ、投与１時間後の時点で特定の細胞集団においてIFNγとTNFαの高発現細胞が存在していることがわかった。一細胞遺伝子発現解析における各細胞集団の特徴遺伝子から各細胞集団の細胞種を推測し、IFNγとTNFαの発現細胞集団と推測した細胞種をフローサイトメトリーで分取した。concanavalin A投与後に経時的に推測された細胞集団の数的変化が確認され、またその遺伝子発現をqPCRで確認したところ、経時的にそれぞれの炎症性サイトカインの発現上昇を認め、一細胞遺伝子発現解析で推測した結果に矛盾しない結果が得られた。以上の実験結果からconcanavalinA投与1時間という肝障害の超早期において肝内の炎症性サイトカイン(IFNγ、TNFα)の産生細胞の同定に成功したと考えた。