Elucidation of molecular mechanism about anti-tumor immune evasion by beta-catenin in hepatocellular carcinoma and its therapeutic application

β-catenin抗肝细胞癌免疫逃逸的分子机制阐明及其治疗应用

• 批准号: 21K16415
• 负责人: 下川 雅弘
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16415/
• 关键词: 抗腫瘍免疫; サイトカイン; β-catenin; 樹状細胞; 肝細胞癌; 腫瘍免疫; 免疫チェックポイント

2022年度の研究では、当研究室で樹立したマウスHCC細胞株(3H3, HrasQ61L)にCas9を用いてPten-KOを行い(3H3-P細胞)、さらにCtnnb1 exon3-skipping (3H3-PC細胞)、およびCtnnb11-4A(constitutive active)を導入(3H3-PC細胞)しβ-catenin高発現細胞を作成した。これらをヌードマウスに皮下移植し、回収された腫瘍サンプルについて次世代シーケンスを用いた解析によりマウス・ヒトで共通するサイトカイン・ケモカイン変化を同定した。一方、もともとβ-catenin高発現 (exon3 skipping) のHepa1-6細胞株にexon2/4型ｍRNAの選択的ノックダウンを行ない(Hepa1-6-C細胞)で上記のサイトカイン・ケモカインの変化を確認中である。上記の3H3-P細胞、3H3-PC細胞およびHepa1-6細胞、Hepa1-6-C細胞を用いたin　vitroでの免疫応答系の再現に時間を要している部分はあるが、mRNA・タンパク発現・Flow cytometryなどを用いて樹状細胞・T細胞の遺伝子発現解析を継続中である。

In 2022, HCC cell line (3H3, HrasQ61L) was established in the laboratory, Cas9 was introduced into Pten-KO cells (3H3-P cells), and Ctnnb1 exon3-skipping cells (3H3-PC cells) and Ctnnb11-4A(continuously active) were introduced into β-catenin high expression cells (3H3-PC cells). This is the first time I've ever seen a woman who's been in a relationship with someone else. The expression of exon2/4 mRNA in Hepa1-6 cell line (Hepa1-6-C cell line) was confirmed in the presence of exon3 skipping. The above 3H3-P cells, 3H3-PC cells, Hepa 1 -6 cells, Hepa1-6-C cells were used in vitro to determine the time required for the reproduction of immune response systems.