抗腫瘍剤抵抗性獲得のための癌細胞による血小板貪食に関する検討

癌细胞吞噬血小板获得抗肿瘤耐药性的研究

• 批准号: 21K16468
• 负责人: 野村 皓三
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16468/
• 关键词: 抗腫瘍剤抵抗性; 血小板; 血小板貪食

研究1 　活性化血小板貪食癌細胞の EMT をはじめとした増殖能の評価目的:血小板貪食癌細胞の癌転移形成における病態解明これまでの実験で活性化血小板貪食癌細胞ではPTENの発現低下、浸潤能増強が見られた結果を得ていることからこれらを癌細胞の増殖能または悪性度の評価基準とした。また、活性化血小板貪食癌細胞が EMT 様の変化をしているかどうかを、形態とともに EMT marker(E-cadhelin、Vimentin、β-actin、Snail、Zeb- 1など)を用いて検討した。さらに抗癌剤Gemcitabine(GEM)単独投与または抗血小板薬単独投与、抗癌剤と抗血小板薬の併用によりこれらの変化を検討し、有用性を証明した。さらに、Panc-1 は極端な栄養飢餓条件であっても、生存することが可能な特徴を持つ。よって栄養飢餓培地(グルタミン・グルコース無し) において血小板貪食癌細胞の形態、EMTマーカー、PTEN発現、アポトーシス抵抗性などを含めた評価を行った。まずは、Panc-1 と血小板の共培養を行い、EMT マーカー(E-cadhelin、Vimentin、β-actin、Snail、Zeb-1など)を用いて評価を検討した。Panc-1 を使用するが、heterogeneity を有する癌腫であるた め、他の細胞株での評価が必要であり、腫瘍細胞 control 群として、食道癌細胞株 KES・TE-5(Podoplanin 発現)、正常株 control としてヒト臍帯静脈内皮細胞 HUVEC を使用した。また、control として休止血小板での貪食能の違いも確認した。

Study 1: Evaluation of the proliferation of activated platelet-bulimia carcinoma cells Objective: To investigate the pathogenesis of tumor metastasis in platelet-bulimia carcinoma cells. EMT marker(E-cadhelin, Vimentin, β-actin, Snail, Zeb- 1) was used to investigate the changes and morphologies of activated platelet-bulimia cancer cells. The anti-cancer agent Gemcitabine(GEM) alone and the combination of anti-platelet agents alone, anti-cancer agents and anti-platelet agents have been investigated and demonstrated to be useful. The Panc-1 is characterized by extreme starvation conditions and survival. In addition, the study of platelet gluttony cell morphology, EMT, PTEN development, and allogeneic resistance was also conducted. Co-culture of platelet with Panc-1 and EMT (E-cadhelin, Vimentin, β-actin, Snail, Zeb-1) was studied. Panc-1 is used in cancer, heterogeneity, evaluation of other cell lines, tumor cell control group, esophageal cancer cell line KES·TE-5(Podoplanin), normal strain control group and umbilical vein endothelial cell HUVEC. The control of gluttony in platelets is confirmed.