Development of specific high-titer immunoglobulin for new coronavirus infections

针对新型冠状病毒感染的特异性高效价免疫球蛋白的开发

• 批准号: 21K16593
• 负责人: 木下 真央
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16593/
• 关键词: SARS-CoV-2; 血清抗体価システム; 特異的高力価免疫グロブリン製剤; 血清抗体価測定システム; 抗体価プロファイリング; 高力価免疫グロブリン製剤

遺伝子組み換え各種S抗原タンパクをAluminum hydroxide・CpG oligodeoxynuleotide・Freund's adjuvantを用いて各種アジュバントを混合したワクチンを作製し、それぞれ経鼻・皮下注射し、免疫化する。8週間後、免疫化したマウスの尾静脈から末梢血や肺胞洗浄液、肺組織図など記録し、免疫化モデルの作成とともに擬似回復期血清のモデルを精製した。遺伝子組換えSタンパク質・ACE2タンパク質などを96ウェルイライザプレートにコーティングし、その後1％牛血清アルブミンでブロッキング処理する。上記実験から得られた血清や免疫グロブリンを希釈し、 37℃・2時間で保温する。その後、HRP複合ヤギ由来抗マウスIgGを二次抗体として使用し37℃・１時間で保温する。プレートをリン酸緩衝液で洗浄した後、結合反応を評価するためTMB試薬を投与する。反応は0.5M硫酸を加えて停止し、450nm波長のスペクトロフォトメーターにより吸光度測定する。吸光度の解析結果から経鼻・皮下投与ともにワクチンの効果を認めた。

通过使用氢氧化铝，CPG寡脱氧核苷酸，Freund的佐剂和其他各种辅助物混合各种佐剂来制备疫苗，并在胸膜内或皮下注入以进行免疫。八周后，从免疫小鼠的尾部静脉记录了外周血，肺泡灌洗液，肺组织图和其他记录，并与免疫模型一起纯化了模拟的康复血清模型。重组S蛋白，ACE2蛋白等被涂在96孔iLizer板上，然后用1％的牛血清白蛋白封闭。从上述实验中获得的血清和免疫球蛋白被稀释，并在37°C保持温暖2小时。之后，来自HRP复合山羊的抗小鼠IgG用作二抗，并保持在37°C。持续1小时。用磷酸盐缓冲液洗涤板，然后给予TMB试剂以评估结合反应。通过添加0.5m的硫酸来停止反应，并使用波长为450 nm的分光光度计测量吸光度。吸光度分析的结果揭示了疫苗在鼻和皮下给药中的有效性。

项目成果

麻酔薬によるアナフィラキシーが疑われ、筋弛緩薬を使用せず先天性心疾患の手術を施行した1症例

怀疑因麻醉引起的过敏反应，在未使用肌松剂的情况下进行先天性心脏病手术的病例。

• 发表时间: 2022
• 期刊: 日本小児麻酔学会誌
• 作者: 須藤 和樹;吉井 龍吾;井上 敬太;堀井 靖彦;木下 真央;山田 知見;早瀬 一馬;柴崎 雅志
• 通讯作者: 柴崎 雅志

ファージ 緑膿菌に対するバクテリオファージと抗PcrV抗体の治療効果の検討

噬菌体和抗 PcrV 抗体对铜绿假单胞菌的治疗效果检查

• 发表时间: 2022
• 作者: 小原 潤也;藤木 純平;須藤 和樹;井上 敬太;木下 真央;湯浅 健人;岩野 英知;佐和 貞治
• 通讯作者: 佐和 貞治

婦人科腹腔鏡手術におけるオランザピンの術後悪心・嘔吐予防効果 多施設共同無作為化比較対照試験

奥氮平预防妇科腹腔镜手术术后恶心呕吐的多中心随机对照试验

• 发表时间: 2022
• 期刊: 麻酔
• 作者: 関 博志;蔵谷 紀文;志賀 俊哉;三浦 倫一;近藤 一郎;木下 真央;仙頭 佳起;増田 祐也;出野 智史;池田 浩平;高野 光司;桑原 雄希;衣笠 梨絵;天谷 史昌;佐和 貞治;祖父江 和哉;森崎 浩
• 通讯作者: 森崎 浩

特殊感染症

特殊传染病

• 发表时间: 2021
• 作者: 木下 真央;柴﨑 雅志
• 通讯作者: 柴﨑 雅志