骨肉腫転移株の作製と転移メカニズムの解明

骨肉瘤转移系的产生及转移机制的阐明

• 批准号: 21K16654
• 负责人: 安田 直弘
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: National Hospital Organization Osaka National Hospital Institute for Clinical Reserch
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16654/
• 关键词: 骨肉腫; 転移; LM8; Dunn; 尾動脈注射

親株から異なる性質の細胞株を樹立し、細胞株間のプロファイルの違いだけでなく、In vitroとIn vivoの移植巣と転移巣におけるマーカーの違いを見出し、骨肉腫の増大や転移に関与する宿主因子や分子メカニズムを同定できれば骨肉腫患者の新たな治療薬シーズとなる可能性がある。当グループで過去にFidlerの方法で肺転移能を強化したLM8を樹立し、LM8マウス皮下移植モデルでほぼ100％肺転移を生じ、同時に骨転移も生じるが、骨転移巣が増大する前に肺転移で死亡するため、骨転移巣から十分な検体を採取することが困難であった。近年報告された尾動脈注射による大腿骨転移モデルの作製に関する論文から、高骨転移株が作製できるのではないかと考えた。今回、尾動脈注射の系を用いてC3Hマウス骨肉腫細胞株Dunnから新たに高骨転移株を作製し、皮下移植で全例骨転移を生ずるモデルを樹立することを目的とした。①Luciferaseで標識したDunn(luc Dunn)の細胞凝集塊を4週齢のC3Hマウス尾動脈に接種し、大腿骨に生着・増殖していることをIn vivo imaging system(IVIS)で評価。②腫瘍組織を採取し、In vitroで培養。③培養細胞Bone metastasis 1(BM1）をマウス皮下に播種し、2-3週後に骨転移を生じるかをIVISで確認。④骨転移が生じなければ、BM1を尾動脈に接種し、上記の方法で骨転移を生じるかを確認し、ほぼ100%で骨転移を生じるまでX回繰り返し、高骨転移株(BMX)を樹立。上記の系を確立するよう試みているが②, ③のところで安定的に細胞を増殖させマウスに接種することができておらず進行が遅れいてる。

The cell lines were isolated, the In vitro In vivo were transplanted, and the bone and flesh were removed. The possibility of new treatment for patients with skeletal muscle disease was not affected by the same molecular markers. When the Fidler method was used to strengthen the lung transplantation of LM8, LM8 was implanted subcutaneously, the lung was transferred at the same time, the bone transfer was induced, the lung was transferred to the lungs before the death, and the bone transfer was very important. In recent years, it has been reported that the tail-end movement of the thigh bone was injected into the thigh bone transfer machine, and the high bone transfer strain was used as an examination. This time, the tail motor injection system is to use the cell line Dunn, the new cell line, the high bone transplant, the subcutaneous transplant, the whole bone graft, the bone graft, the bone graft, 1Luciferase tagged Dunn (luc Dunn) cell agglutination test 4, C3H tail inoculation, and thigh bone production of colony colony antigen In vivo imaging system (IVIS). 2. Tissue sampling and In vitro training were carried out. 3 Bone metastasis 1 (BM1) cells were inoculated subcutaneously, and bone transfer after 2-3 years old was confirmed by IVIS. (4) Bone transfer, BM1 tail transfer, bone transfer, bone transfer, high bone transfer, bone transfer, bone transfer The above record is to make sure that the cells that are stable and stable are not safe and stable.