単一細胞解析を利用した抗炎症性ヒト脂肪組織由来幹細胞の同定と顎関節症治療への応用

使用单细胞分析鉴定抗炎人脂肪组织来源的干细胞及其在颞下颌关节疾病治疗中的应用

• 批准号: 21K17084
• 负责人: 稲木 涼子
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K17084/
• 关键词: 脂肪細胞; シングルセル解析; 顎関節症; 間葉系幹細胞; ASC; 抗炎症作用; 脂肪由来幹細胞

ヒト脂肪細胞を単離してシングルセルRNA解析する準備のために、マウス脂肪細胞を単離して培養した。この増殖培養した細胞を回収し、FACSにてシングルセルにすることが可能であることを確認した。脂肪細胞と骨髄細胞と歯髄細胞のシングルセルRNA解析を行い、脂肪細胞の有用性を比較検討する準備を整えた。ヒトの骨髄細胞はパッセージ2まで培養し冷凍保存している。またヒト歯髄細胞は、歯を割り歯髄を取り出し、細切してコラゲナーゼ処理してエクスプラントカルチャーとして培養に成功している。これらの細胞をパッセージ２で冷凍保存を行った。今後、脂肪細胞、骨髄細胞、歯髄細胞をパッセージ3に合わせてシングルセルRNA解析を行う予定である、現在、細胞単離のためにFACS装置が故障しており、修理された時点でシングルセルRNA解析を実施する予定である。また、申請している本研究で、変形性ヒザ関節症のモデルマウスの膝関節にマウス脂肪幹細胞を投与することで、膝関節の抗炎症効果を前年度確認している。既に、この結果に基づき、再生医療等委員会にて、臨床研究の計画書は承認されている。この計画書に基づき、ヒト顎関節症の患者へ、ヒト由来脂肪の関節内投与の臨床研究の準備を行っている。外来で研究について広報し、顎関節症の2名の患者を選定するに至った。来年度、臨床研究を行うために、院内CPCにてコールドランを実施し、臨床研究プロトコルの確認と人員の実施体制と準備を整えた。

Adipose cells are prepared for RNA analysis and cultured. The culture of these cells was confirmed by FACS. Adipose cells and bone marrow cells are prepared for RNA analysis and comparative study of their usefulness. The bone cells of the rabbit can be cultured and cryopreserved in the basement. The cells were harvested and microdissected. The cells were frozen. In the future, fat cells, bone cells, and dental cells will be combined to perform RNA analysis. At present, FACS devices will fail and repair at predetermined times. This study was conducted to confirm the anti-inflammatory effects of adipocyte stem cells on knee joints in patients with atypical arthrosis. In addition, the results of this study were reviewed by the Committee on Regenerative Medicine, and the clinical research proposal was approved by the Committee. The project is aimed at preparing for clinical studies on intraarticular administration of fat from patients with mandibular arthrosis. Two patients with jaw arthrosis were selected for the study. In the coming years, clinical research will be carried out, and the CPC will be responsible for the implementation of clinical research, the confirmation of clinical research personnel, and the preparation of the implementation system.