液-液相分離に着目したクリミア・コンゴ出血熱ウイルス複製複合体形成機構の解析

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ブニヤウイルス目は２/3分節(-)ssRNAをゲノムとして持ち、数多くの致死的な人獣共通感染症原因ウイルスが属す。代表例の１つであるクリミア・コンゴ出血熱ウイルス(CCHFV) は最大30％の致死率となる出血熱を引き起こし、アフリカからユーラシアにかけ広く分布しており、本邦への侵入も危惧される。その感染機構は不明な点が多く、ワクチンおよびウイルス特異酵素/病態機構を標的とする治療法開発のための基盤情報が必要である。本研究では液-液相分離という現象に着目し、CCHFVの複製複合体形成機構の分子基盤の解明を試みる。本年度では、複製複合体の主要構成要素であるCCHFV核タンパク質(N)の結合宿主因子の網羅的解析を試みた。近位依存性ビオチン化酵素であるAirIDを融合したNタンパク質の発現系を構築し、細胞内にてNに結合（もしくは極めて近い空間的位置に存在する）宿主タンパク質をビオチン標識し、MS/MS解析にて同定した。結果、RNA結合タンパク質であるZFP36L1等の様々な宿主因子が同定された。一部のものについては免疫沈降法および間接蛍光抗体法により結合が確認された。また、これら因子を過剰発現させた際のウイルス複製の評価系であるミニゲノム系への影響を評価した。結果、ウイルス複製効率の低下が認められ、これら結合因子はウイルス複製を抑制する機能であることが示された。現在、具体的な複製制御機構についての解析を実施している。