ヒトiPS細胞由来肝オルガノイドによるヒトHSC増殖支持機構の解明

使用人 iPS 细胞来源的肝类器官阐明支持人 HSC 增殖的机制

• 批准号: 22K15123
• 负责人: 角出 啓輔
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15123/
• 关键词: ヒト造血幹細胞; iPS細胞; 胎児肝; 胎児造血; 肝オルガノイド; 造血幹細胞

ヒトiPS細胞由来肝芽細胞(iHep)・同由来星状間質細胞様細胞(iSC)・同由来類洞内皮細胞様細胞(iSEC)をそれぞれ5:1:4の割合でスフェロイドを形成させ、マトリゲルに封入し(総細胞数1.0-4.5x10^7)NSGマウスに移植した。しかし、HSCを直接移植するに足る十分な大きさの移植片が形成されなかった。そこで、上記構成の移植物に同数のHuVEC及びヒト成人骨髄由来間葉系間質細胞を混合したところ、十分な大きさの移植片の形成が認められた。また、この移植片はわずかに血管構造を認めた。この移植片にヒト臍帯血由来CD34強陽性CD133陽性造血幹細胞を移植したところ、移植片内においてヒトCD45陽性細胞の生着が認められた。この移植片のうち、増殖を認めたものは、主にヒト間葉系間質細胞であり、iHepは依然として増殖しないままであった。そこで、14日間のin vitroにおけるiHepの増殖様式を検討した。その結果、ヒトiPS細胞より分化誘導開始後7日前後、CXCR4陽性difinitive endoderm様細胞からHNF4α陽性AFP陽性細胞に到る段階において、HGFRアゴニストDihexa及びCHIR99021、Y-27632、A-8301、iMatrix-511存在下で、約50-100倍程度に増殖することが観察された。今年度は、移植後増殖可能なiHepの分化段階及び移植剤の条件を検討し、ヒト臍帯血造血幹細胞を支持する胎児肝様環境構築を目指す。

The origin of iPS cell (iHep) is the same as that of stellate cell (iSC). The same origin is the same as that of cave endothelial cell (iSEC). The cells are cut at 5:1:4, and the cells are sealed and sealed. (the number of cells is 1.0-4.5x10 ^ 7). The direct transplantation of HSC is very large, and the grafts are very large. The same number of grafts, the same number of grafts, the same number of HuVEC and the same number of grafts, the same number of grafts, and the same number of adult bone grafts. The grafts were grafted, and the blood vessels were confirmed. The blood causes of CD34 strong CD133 hematopoietic cell transplantation and intra-graft CD45 cell transplantation are closely related to the blood origin of the graft. The grafts have been grafted, the colonies have been confirmed, the host cells have been infected, and the iHep has remained intact. In the past 14 days, the in vitro will have to sell the iHep colonies for the first time. The results showed that 7 days after the start of differentiation of iPS cells, CXCR4 difinitive endoderm cells showed HNF4a positive AFP cells, HGFR cells expressed Dihexa and CHIR99021, Ymur27632, Alwyn 8301, iMatrix-511 existed, and about 50-100fold colonization was observed. This year, after transplantation, it is possible to differentiate into iHep segments and transplant conditions. Hematopoietic stem cells support the environmental indicators of fetal liver.