酸塩基反応型ペプチド固相合成用アミン呈色試薬の開発と実用化研究

点击翻译按钮获取中文摘要

本年度は、これまで用いてきたアミン検出試薬より小さなpKaを有する塩酸塩型アミン検出試薬を用いてペプチド固相樹脂上のアミノ基検出を行った。pKaの小さなアミン検出試薬は、樹脂上のアミンによる塩酸塩の脱塩が容易に起こりやすくなるため、アミン検出の定量性の改善や樹脂上に存在するアミノ酸の種類に依存しないアミン検出が可能になることが期待される。ペプチド固相樹脂上のアミン検出の結果、これまで用いてきたpKaが6.7の塩酸塩型アミン検出試薬を用いて様々なアミノ酸の検出を行ったところ、一部のアミノ酸では、検出結果に他のアミノ酸との差異が生じていたのに対して、pKaが4.5の検出試薬を用いて樹脂上アミノ基の検出を行った場合では、その差異が非常に小さくなった。この結果から、pKaの小さなアミン検出試薬はアミノ酸の種類に依存しにくいことが明らかとなり、今後の分子設計に有益な知見が得られた。また、これまでの研究では、樹脂上に導入した１残基のアミノ酸のみの検出に限定していたが、現在、実際のペプチド合成にも本化合物を用いてアミン検出法の適用を調査している。ペプチドの長さとして現在、８残基のアミノ酸の伸長を行い、その過程でアミン検出を行い、反応の進行を定量的に調査している。その結果、現在までに、一般的に用いられているアミン検出法であるカイザーテストでは検出できないアミノ酸の検出が可能であることが示され、合成したペプチドの純度も非常に高いことが明らかとなっている。