ORP6による非小胞性脂質輸送の分子機構および生体機能の解明

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本研究の目的は、ORP6による非小胞性脂質輸送の分子機構とその生体機能を解明することである。細胞内の膜小器官接触部位ではコレステロールやphosphatidylinositol 4-phosphate (PI4P), phosphatidylserine (PS)などの脂質がタンパク質や小胞によって輸送される。タンパク質での輸送は輸送速度が速く、異なる脂質を独立して輸送することが可能であるが、その輸送を担う分子機序は不明である。申請者は、Oxysterol binding protein-related protein (ORP) 6が小脳や脊髄に多く発現し、神経細胞内の小胞体と細胞膜との間でPI4PやPSの輸送に働くこと、培養神経細胞の生存に寄与することを発見した。しかしながら、ORP6の生体機能は不明である。これまでに、培養細胞の分化誘導後にORP6mRNAやタンパクの発現量が増加することが報告されている。申請者は、小脳顆粒細胞の分化や移動の時期にORP6タンパクの発現量が増加することを見出したが、ORP6が小脳発達に及ぼす影響は不明である。そこで申請者は、培養神経細胞およびIn utero electroporation法による遺伝子改変動物を用いて小脳発達におけるORP6の機能を解析中である。申請者は、Neuro2A細胞の分化時にORP6タンパクの発現量が増加することを見出した。さらに、ORP6発現抑制下およびORP6ドミナントネガティブ変異体や脂質結合ドメインを欠失したORP6変異体の発現下では、細胞分化後の突起伸長に変化がみられた。初代培養小脳顆粒細胞においては、ORP6発現抑制下において成熟神経細胞の割合が変化し、ORP6が小脳顆粒細胞の分化に関与する可能性を見出した。