膵腺房導管異形成が誘発する膵癌遠隔転移のメカニズム解明

2022年度の実績として①exVivo 膵腺管導管異形成モデルの確立②膵腺管導管異形成のタンパク発現評価③膵腺管導管異形成が癌細胞に及ぼす影響評価を行った。それぞれの概要は①野生型C57BL/6Jマウスより膵腺房細胞を単離しTGFaを添加し4日間培養することで膵腺房導管異形成を誘発することが形態変化として確認した。さらに、RNA発現(RT-PCR)・タンパク発現(Western blotting、免疫蛍光染色)により形質変化を確認した。また。さらに、複数回の実験を行うことで手技として安定的に膵腺房導管異形成を起こすことが可能となった。②膵腺管導管異形成が産生している物質をサイトカインアッセイにより解析した。膵腺房導管異形成を起こした細胞とその培養上清からタンパクを抽出しサイトカインアッセイを行った。その結果、膵癌の浸潤や遠隔転移に寄与している報告があるOsteopontinやGalectin-1等のサイトカインが膵腺管導管異形成が起こることで著明に増加していることが明らかとなった。③膵腺房細胞を単離・培養し膵腺管導管異形成を起こし、その培養上清をマウス膵癌細胞株(PanO2)に添加し、膵癌細胞への影響を評価した。結果として、癌細胞の形態が変化することを確認した。さらに、細胞から抽出したタンパクからはAktのリン酸化が著明に増加していることが明らかとなった。以上より、膵腺房導管異形成が膵癌の進展や転移に寄与している可能性が示唆される結果を得た。

2022年度の実績として①exVivo 膵腺管導管異形成モデルの確立②膵腺管導管異形成のタンパク発現評価③膵腺管導管異形成が癌細胞に及ぼす影響評価を行った。それぞれの概要は①野生型C57BL/6Jマウスより膵腺房細胞を単離しTGFaを添加し4日間培養することで膵腺房導管異形成を誘発することが形態変化として確認した。さらに、RNA発現(RT-PCR)・タンパク発現(Western blotting、免疫蛍光染色)により形質変化を確認した。また。さらに、複数回の実験を行うことで手技として安定的に膵腺房導管異形成を起こすことが可能となった。②膵腺管導管異形成が産生している物質をサイトカインアッセイにより解析した。膵腺房導管異形成を起こした細胞とその培養上清からタンパクを抽出しサイトカインアッセイを行った。その結果、膵癌の浸潤や遠隔転移に寄与している報告があるOsteopontinやGalectin-1等のサイトカインが膵腺管導管異形成が起こることで著明に増加していることが明らかとなった。③膵腺房細胞を単離・培養し膵腺管導管異形成を起こし、その培養上清をマウス膵癌細胞株(PanO2)に添加し、膵癌細胞への影響を評価した。結果として、癌細胞の形態が変化することを確認した。さらに、細胞から抽出したタンパクからはAktのリン酸化が著明に増加していることが明らかとなった。以上より、膵腺房導管異形成が膵癌の進展や転移に寄与している可能性が示唆される結果を得た。