肝癌の治療効果予測におけるハイスループット・リキッドバイオプシーシステムの構築

预测肝癌治疗效果的高通量液体活检系统的构建

• 批准号: 22K15600
• 负责人: 村岡 優
• 金额: $ 3万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15600/
• 关键词: リキッドバイオプシー; cell free DNA; 肝細胞癌

肝細胞癌診療におけるリキッドバイオプシーにおいて、簡便に高精度な検査が望ましい。本施設では腫瘍由来のcell free DNA (cfDNA)をデジタルPCR (dPCR)で解析する手法を確立した。早期肝細胞癌から古典的肝細胞癌まで高頻度にみられるTERT promoter C228T変異をdPCRで検出し、定量的評価に応用した。本施設のこれまでの報告より、TERT promoter変異陽性cfDNA (以下mutant cfDNA)量は腫瘍量を反映し、特に治療後のmutant cfDNAの変化は短期間の腫瘍壊死量を反映していた。アテゾリズマブ・ベバシズマブ併用療法後のmutant cfDNA量を解析したところ、治療後短期間のmutant cfDNA増加量は乏しく、既報にあるチロシンキナーゼ阻害剤 (TKI)治療後のmutant cfDNA量の増加と異なる動態を確認した。また、アテゾリズマブ・ベバシズマブ併用療法著効例では2コース目開始時点のmutant cfDNAが消失している症例がみられた。肝細胞癌治療後のmutant cfDNA量の動態は使用する薬剤による相違があると考えられ、治療効果の早期予測へ応用するために臨床検体を用いた検討を継続する必要がある。肝細胞癌の薬物治療は2022年12月にデュルバルマブ・トレメリムマブ併用療法が認可されたことで、今後免疫チェックポイント阻害剤の使用頻度が増えると考えられる。また、CTNNB1変異の有無と免疫チェックポイント阻害剤の治療効果について注目されている。既存のデータベースより、肝細胞癌にみられるCTNNB1変異はchr3: 41224606-41224646 (GRCh38)の約40bpの領域に集中していることが分かり、複数の変異を同時に検出するmultiplex digital PCRの検査系の開発に着手した。

The diagnosis and treatment of hepatocellular carcinoma is easy and accurate. The present invention provides a method for analyzing cell free DNA (cfDNA) from tumor origin by PCR (dPCR). Early hepatocellular carcinoma (HCC) and classical HCC are highly frequent, and TERT promoter C228T mutations are detected and quantified by dPCR. The amount of mutant cfDNA (hereinafter referred to as mutant cfDNA) detected by TERT promoter in this study reflects the amount of tumor growth and the amount of tumor growth in the short term after treatment. The analysis of mutant cfDNA quantity after treatment with TKI, the increase of mutant cfDNA quantity in short term after treatment, and the change of mutant cfDNA quantity after treatment with TKI were confirmed. For example, the mutant cfDNA disappeared at the beginning of the treatment. The dynamics of mutant cfDNA after hepatocellular carcinoma treatment In December 2022, the combination therapy of hepatocellular carcinoma drugs was approved. In the future, the frequency of use of immune drugs will increase. CTNNB1 is different and has no immune response. The development of multiplex digital PCR detection system for the detection of existing DNA sequences, hepatocellular carcinoma, CTNB1 variants, chr3: 41224606-41224646 (GRCh38), was initiated in an approximately 40bp region.

项目成果

進行肝細胞癌薬物療法におけるcell free DNA量を用いたリキッドバイオプシーの臨床応用

游离DNA量液体活检在晚期肝癌药物治疗中的临床应用

• 发表时间: 2022
• 作者: 村岡優; 前川伸哉; 榎本信幸
• 通讯作者: 榎本信幸

Clinical Indications for Liquid Biopsy using Cell Free DNA Content in the Pharmacotherapy of Advanced Hepatocellular Carcinoma

使用游离 DNA 含量进行液体活检在晚期肝细胞癌药物治疗中的临床适应症

• 发表时间: 2022
• 作者: Nishikawa Gen;Kawada Kenji;Hanada Keita;Maekawa Hisatsugu;Itatani Yoshiro;Miyoshi Hiroyuki;Taketo Makoto Mark;Obama Kazutaka;村岡 優;Masaru Muraoka
• 通讯作者: Masaru Muraoka