KRAS変異型大腸癌に対するASNS阻害剤開発と治療予測バイオマーカーの探索

点击翻译按钮获取中文摘要

アスパラギン合成酵素 (ASNS) 阻害作用を有するヒット化合物 (AS5) をもとにしたリード化合物の候補 5種類を、In vitro細胞増殖アッセイにおいて評価した。結果、IC50はおおよそ400-500μMと有効な化合物とはいえず、さらなる候補化合物の検討が必要であった。一方、患者由来大腸癌スフェロイド (PDS) 37株のASNS発現を免疫組織染色で評価したところ、12株 (32.4%) でASNS発現が高く、25株 (67.6%)でASNS発現が低いことが分かった (Cells. 2022;11(20):3273)。ASNS発現が高いPDS 2株を用い、shRNAを用いASNSをノックダウン株を樹立した。ASNSのノックダウンはウエスタンブロットにより確認した。その2株を用いて、In vitroにおいて細胞増殖を評価したところ、アスパラギン枯渇培地ではASNSノックダウン株はコントロール株と比べて細胞増殖が抑制された。また、L-asparaginaseを投与したところASNSノックダウン株はコントロール株と比べて細胞増殖が抑制された (Cells. 2022;11(20):3273)。In vivoでASNSノックダウン株において腫瘍増殖を評価したところ、L-asparaginase投与群はvehicle群と比べ腫瘍増殖抑制効果を認めた (Cells. 2022;11(20):3273)。