網羅的遺伝子発現解析を用いた過敏性腸症候群(IBS)の病態解明

利用综合基因表达分析阐明肠易激综合征 (IBS) 的病理学

• 批准号: 22K15986
• 负责人: 屋嘉比 聖一
• 金额: $ 3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15986/
• 关键词: 過敏性腸症候群（IBS）; 下痢; 副腎皮質刺激放出因子(CRF); 網羅的遺伝子発現解析; 嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子(CFTR); 過敏性腸症候群

過敏性腸症候群（IBS）における下痢発症の機序についてラットを用いて検証した。既に報告のあるように、ラットにストレスをかける代わりに副腎皮質刺激放出因子(CRF)を腹腔内投与（IP）し、下痢を誘発することとした。初めに、ラットに下痢を起こす至適容量を確認する目的で複数の容量でCRFを投与し、排便数および下痢発症について確認し、既報と同様にCRF(10μg/kg)を良好な下痢の出現を認めた。また、既報と同様にCRF投与後の排便時間についても検証し、既報同様６０分で良好な結果が得られた。次に、CRF投与群とコントロール群各々から４匹づつ回腸末端を摘出し、網羅的遺伝子発現解析を行った。これらの結果として、水分泌に関与する項目について有意な差を認めており、詳細については現在解析中である。また、これら水分泌に関与するチャンネルの一つとして嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子(CFTR)に着目しており、CFTR-inhなどを用いて排便や下痢の発症を抑制できるか検証している。しかしながら、これらinhibitorをラットに用いた既報はあまりなく、投与のタイミングや容量などについて検証する必要があり、既報を参考に投与時間や投与容量を検証しているが、試薬の溶解のしづらさなどもあり溶解方法などについても濃度なども含め検証している。また、今回使用している試薬はDMSOで溶解したため、DMSO自体のラットへの影響を検証する必要があり、実際に種々の濃度や容量での検証を行い、ラットへの影響がないことを確認し、実際のCFTR-inh投与を行なった。これらの結果より一定の結果は現在得ているが、詳細については今後追加実験を行い症例数を増やして検討していく予定である。

在大鼠中验证了肠易激综合征（IBS）中腹泻的机制。如据报道，用肾上腺皮质释放因子（CRF）腹膜内（IP）给予大鼠，而不是压力大鼠，以诱导腹泻。首先，施用了多卷CRF，以确认大鼠腹泻的最佳体积，并确认排便和腹泻发作的数量，并且如前所述，CRF（10μg/kg）被观察到腹泻良好。另外，如前所述，还验证了CRF给药后的排便时间，并且与先前的报告一样，在60分钟内获得了良好的结果。接下来，从每个CRF管理组和对照组中去除回肠的四端，并进行了全面的基因表达分析。结果，观察到参与水分分泌的项目的显着差异，并且目前正在分析细节。我们还专注于囊性纤维化膜电导调节剂（CFTR）作为液体分泌所涉及的通道之一，我们已经验证了CFTR-INH和其他因素是否可以用于抑制肠运动和腹泻的发作。但是，很少有关于在大鼠中使用这些抑制剂的报道，因此有必要验证给药的时间和量数，尽管根据先前的报告对给药时间和给药量进行了验证，但还检查了给药时间和给药量，因为很难溶解试剂，因此还包括溶解方法和其他因素和其他因素，包括浓度，包括浓度，包括浓度。此外，由于这段试剂使用的试剂溶解在DMSO中，因此有必要验证DMSO本身对大鼠的影响，并且实际上在各种浓度和体积下验证了结果，证实对大鼠没有影响，并且对CFTR-INH的实际给药。尽管我们目前已经从这些结果中获得了某些结果，但我们计划考虑将来进一步实验以增加病例数。