関節リウマチ患者の滑膜一細胞解析によるTNF-α阻害剤反応性予測マーカーの探索

通过类风湿关节炎患者滑膜单细胞分析寻找 TNF-α 抑制剂反应性的预测标记

• 批准号: 22K16354
• 负责人: 土屋 遥香
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16354/
• 关键词: 関節リウマチ; 滑膜; シングルセル解析

令和4年度は、RA分類基準（ACR/EULAR 2010年）を満し、発症早期（1年以内）、MTX-IR（MTXが3か月以上投与されても低疾患活動性以下に未到達）の患者から、研究内容に関して文書説明と同意を取得した。同意が得られた患者から、治療開始前の臨床情報（年齢・性別・自己抗体・疾患活動性評価指標・身体機能障害評価指標等）、関節滑膜（超音波ガイド下滑膜針生検などを用いて採取）・末梢血を収集した。関節滑膜の細胞懸濁液から分離した単核球に、CITE-seq抗体の添加と免疫蛍光染色を施し、フローサイトメーターを用いて生細胞を分取した（1検体あたりの目安: 10,000細胞）。10x Genomics Chromiumシステムを用いてシングルセルライブラリーを調整した。この一連の工程において、データの質の担保とコスト削減の両立を目指すため、プロトコルを改善した。

Ling and 4 years of clinical trials, RA classification criteria (ACR/EULAR 2010), early stage of the disease (within 1 year), patients with MTX-IR (less than 3 months of MTX exposure and lower activity of low disease), and the contents of the study clearly agreed to obtain the diagnosis. It is agreed to have sex with the patients before the start of the treatment, to have sex with their own antibodies, to have sex before the start of the treatment, to have sex with their own antibodies, to have an active disorder, and to have a synovium (synovium, synovium. Synovium, cellular fluid, nuclear globule, CITE-seq antibody, immuno-staining, immunostaining, immunostaining and immunostaining were used to separate the synovium, cell, cell, 10x Genomics Chromium