老化細胞除去薬による変形性膝関節症由来滑膜幹細胞の高品質化と治療効果の検討

使用senolytic剂提高膝骨关节炎来源的滑膜干细胞的质量并检查治疗效果

基本信息

批准号：
22K16708
负责人：
遠藤健太郎
金额：
$ 3万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16708/
关键词：
間葉系幹細胞細胞老化滑膜 ABT-263 変形性膝関節症老化細胞除去薬

项目摘要

変形性膝関節症（OA）に対する治療法の開発は現在社会的に喫緊の課題となっている。申請者らは滑膜間葉系幹細胞（滑膜MSCs）の注射がOA治療効果を有することを実証してきた。一方で、OA患者の滑膜MSCsには老化細胞が多数混入しており、それによりOA治療効果が阻害されるという新たな問題が明らかとなった。したがって本研究では、ABT-263により質の悪い老化細胞のみを除去することで、OA患者由来滑膜MSCsの高品質化を試み、より有効性の高いOA治療の開発を目指す。2022年度はABT-263によるOA患者由来滑膜MSCsの高品質化を試みた。OA患者5名由来の滑膜MSCsをABT-263で24時間処理し、細胞機能を多角的に評価した。ABT-263処理により、老化関連βガラクトシダーゼ（SA-β-gal）陽性細胞の割合とBCL-2の発現が有意に減少し、カスパーゼ3誘導性のアポトーシスが認められた。MSCsのネガティブマーカーであるCD34発現はABT-263処理により有意に低下した。ABT-263処理細胞は、より多くの大きなコロニーを形成し、多分化能（特に軟骨分化と脂肪分化）が向上した。軟骨分化においては、グリコサミノグリカンとII型コラーゲンを大量に生成し、老化マーカーの発現が低かった。上記の結果から、OA患者由来の滑膜MSCをABT-263で処理することで、老化細胞を選択的に除去し、細胞の機能を向上させることに成功した。これは、ABT-263が細胞ベースのOA治療法の開発に有用であることを示している。

目前，膝盖骨关节炎（OA）的治疗方法目前是一个紧迫的社会问题。申请人表明，注射滑膜间充质干细胞（滑膜MSC）对OA具有有效的治疗方法。另一方面，已经揭示了一个新问题，因为OA患者的滑膜MSC被许多衰老细胞污染，这抑制了OA治疗的有效性。因此，在这项研究中，我们试图通过仅使用ABT-263去除质量不佳的衰老细胞来提高OA患者的滑膜MSC质量，并旨在开发更有效的OA治疗。在2022财年，我们尝试使用ABT-263提高OA患者的滑膜MSC的质量。来自五名OA患者的滑膜MSC用ABT-263治疗24小时，以从多个角度评估细胞功能。 ABT-263的处理可显着降低与caspase-3诱导的细胞凋亡的衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-GAL）阳性细胞和BCL-2表达的比例。 CD34表达是MSC的负标记，通过ABT-263处理可显着降低。 ABT-263处理的细胞形成了更多大菌群，改善了多能性（尤其是软骨和脂肪分化）。在软骨分化中，产生了大量的糖胺聚糖和II型胶原蛋白，导致衰老标记的表达低。基于上述结果，可以通过从ABT-263患者中治疗滑膜MSC并改善细胞功能来选择性地去除衰老细胞。这表明ABT-263可用于开发基于细胞的OA疗法。