Elucidation of the pathogenesis of endometriosis-associated ovarian cancer by forward genetic screening.

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明細胞癌、類内膜癌はゲノム解析が進み、ARID1A変異、PIK3CA変異を多く認めることがわかっているが、子宮内膜症から明細胞癌および類内膜癌がどのように発生するか未だ不明である。本研究では明細胞癌、類内膜癌が内膜症から発生する機構を、内膜症オルガノイドを用いたClustered regularly interspaced short palindromic repeats（CRISPR）スクリーニングによる順遺伝学的なアプローチで明らかにする。2022年度は子宮内膜症手術検体からオルガノイド作成を行った。卵巣癌オルガノイドと同様の培養法（NankiY et al. Sci Rep 2020）では子宮内膜症オルガノイドは効率的に作成することはできなった。培養法の検討を行い、内膜症オルガノイドの培養に最適な培地を開発することができた。ARID1A変異、PIK3CA変異の双方が入っている内膜症オルガノイド、ARID1A変異を有しPIK3CA変異を有さない内膜症オルガノイド、ARID1A, PIK3CAの双方の変異を有さない内膜症オルガノイドを安定的に培養することができた。CRISPRノックアウトライブラリー、CRISPR強制発現ライブラリーのプラスミド作成およびウイルス溶液調整を行った。また明細胞癌オルガノイドおよび類内膜癌オルガノイドのライブラリー作成およびエクソーム解析、トランスクリプトーム解析を並行して進めた。