腹膜環境誘導性Notchシグナルを基軸とした卵巣癌腫瘍内不均一性の解明と標的化

基于腹膜环境诱导的Notch信号阐明和靶向卵巢癌瘤内异质性

基本信息

批准号：
22K16858
负责人：
杉山麻衣
金额：
$ 3万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

研究代表者らは、卵巣癌腹膜播種微小環境形成において、卵巣癌-OCAMs間のNotchシグナルを介した直接的な異種細胞間クロストークが、卵巣癌細胞の細胞運命を変化させ、環境誘導性に一部の腫瘍内不均一性を形成するのではないかと考えた。本研究では、独自に樹立したNotchシグナル可視化卵巣癌細胞株を使用して、in vitro/in vivoにおいてNotchシグナルの活性化をイメージングし、活性化細胞と非活性化細胞における薬剤抵抗性の相違や関連するメカニズムを詳細に解明するとともに、Notchシグナルの起点となるOCAMsを治療標的として、治療候補物質を探索する。本年度には①Notch活性化細胞における遺伝子発現変化の解析の為、上述したNotchシグナル可視化卵巣癌細胞株をOCAMsと共培養するin vitro腹膜播種モデルにおいて、Notch活性化・非活性化細胞をフローサイトメトリーにより分取してRNAシーケンスを行った。研究代表者らはこの解析結果から、Notch活性化細胞における薬剤抵抗性に関わるメカニズムの候補を見出した。さらに、②Notch活性化細胞における薬剤抵抗性の評価のため、同様の実験系にシスプラチン等既存の殺細胞性抗癌剤を投与し、Notch活性化と薬剤抵抗性の相関を検証した。研究代表者らは、Notch活性化を抑制することで薬剤抵抗性を下げる効果を確認した。この様に研究代表者らは卵巣癌腹膜播種微小環境、特に腹膜中皮細胞と卵巣癌細胞との相互作用において、Notchシグナル活性化による腫瘍内不均一性形成と薬剤抵抗性獲得のメカニズムの一端を明らかにした。今後、OCAMsで発現するNotch活性化の起点となる候補遺伝子の発現を制御する治療候補物質探索のため、細胞株樹立等評価系構築を進める。

研究人员怀疑在腹膜癌和OCAM之间通过Notch信号直接在腹膜传播微环境中直接通过Notch信号来改变卵巢癌细胞的细胞命运，并在环境诱导的方式中形成一些肿瘤内异质性。在这项研究中，我们使用独特建立的Notch信号可视化卵巢癌细胞系在体外/体内激活Notch信号的激活，详细阐明了耐药性和激活细胞之间的耐药性和相关机制的差异，并使用OCAM进行了使用ocams的潜在治疗物质，而这些方法是使用NocAMS的启动点的启动点。在今年，1）通过流式细胞仪在体外腹膜传播模型中通过流式细胞仪分析基因表达的变化，将缺口激活和失活的细胞收集，其中上述Notch信号可视化的卵巢癌细胞系与OCAM共培养。从该分析的结果来看，研究人员发现候选机制参与了缺口激活的细胞中的耐药性。此外，为了评估缺口激活细胞中的耐药性，将现有的细胞化学抗癌药（如顺铂）施用到类似的实验系统中，以验证Notch激活与耐药性之间的相关性。研究人员证实了抑制Notch激活在降低耐药性中的影响。通过这种方式，研究人员阐明了一种机制，通过这种机制，Notch信号激活会导致卵巢癌微环境中的肿瘤内异质性和耐药性获取，尤其是在腹膜中皮细胞和卵巢癌细胞之间的相互作用中。将来，我们将继续建立细胞系和其他评估系统，以寻找控制候选基因表达的治疗候选物质，这些物质将成为OCAM中表达的Notch激活的起点。