Establishment of anti inflammatory therapy based on the regulation of cytokine storm at local inflammatory environment in the jawbone.

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根尖性歯周炎におけるサイトカインストームに関連するバイオマーカーを特定することで、局所炎症に対する新たな抗炎症アプローチを構築することを目的とする。本研究では、「CXCL9-CXCR3 axisに関連する炎症性細胞が顎骨内でサイトカインストームを誘引することで局所炎症環境を著しく増悪させ病態を難治化させる。」という仮説を検証する。具体的な研究計画として、歯根尖切除術の際に摘出されたヒト根尖病変を採取し、炎症動態解析および多重免疫蛍光染色による組織学的解析を実施する。これらの結果と疾患スコア(Periapical Index等)との因果関係を検討することで顎骨内局所炎症環境下におけるサイトカインストームに関連するバイオマーカーの特定に取り組む。現在、病変サンプルからの炎症性細胞の単離培養プロトコールが作製されて安定した細胞の採取を行うことができている。単離培養した細胞からRNA抽出およびcDNA合成を行うプロトコールに関して現在調整を行なっている。同時並行して組織学的解析に関しては、パラフィン包埋されたサンプルを6~8μmで切片を作製し、同定された候補因子の免疫染色実施に際しての前準備を行なっている。また、単離培養した細胞に対してrhCXCL9添加することでIL-1 beta、TNF alfaといった炎症性サイトカインを含む炎症関連因子の動態に関してreal time PCR解析を使用し明らかにするため、単離培養した細胞群に対する免疫組織化学蛍光染色を先行実施することでトリガーとなる因子の局在が評価できている。