褐色脂肪細胞とベージュ脂肪細胞のミトコンドリア機能を促進する新たな治療法の探索

寻找促进棕色和米色脂肪细胞线粒体功能的新疗法

基本信息

批准号：
22K17358
负责人：
青木明
金额：
$ 3万
依托单位：
Meijo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

これまでに、良姜から得られた抽出物には褐色脂肪細胞 (BA) のミトコンドリア機能を促進する活性成分が含まれることを見出している。今年度は、その活性成分の絞り込みを行った。初代培養ラットBAにおけるUCP1タンパク質発現量を指標として、固相抽出法により得られた複数の画分について、ミトコンドリア機能の活性作用を有する画分を絞り込んだ。さらに、UCP1タンパク質発現増加作用が認められた画分について、LC-MS/MSを用いて含有成分の同定を行った。その結果、いくつかのフラボノイドが同定された。BAのミトコンドリア機能の活性化に関与する細胞内メカニズムを解明するために、オミクス解析を実施することを計画している。これまでは、主に初代培養ラットBAを使用して検討してきたが、データベースが豊富なヒト細胞株を使用した方がオミクス解析には有利であると考えられる。そこで、ヒトBA株であるA41BAT-SVFを用いたアッセイ系の構築を行った。A41BAT-SVFにBA分化誘導培地で培養して、UCP1タンパク質発現量を測定した。結果、分化誘導14日以降からUCP1タンパク質発現量の顕著な増加が認められた。さらに分化誘導したA41BAT-SVFに良姜抽出物を処理したところ、初代培養ラットBAと同様に、UCP1タンパク質発現量の有意な増加が見られた。このことから、A41BAT-SVFを用いたアッセイ系は、BAのミトコンドリア機能を促進する細胞内メカニズム探索に利用可能であると考えられた。

迄今为止，已经发现从Ryangeng获得的提取物包含活性成分，可促进棕色脂肪细胞（BA）中的线粒体功能。今年，我们缩小了活性成分。将UCP1蛋白在原代培养大鼠BA中的表达水平作为指数，将具有活性线粒体功能的分数缩小，以缩小通过固相提取获得的多个分数。此外，使用LC-MS/MS鉴定出具有增加UCP1蛋白表达的作用的分数中包含的成分。结果，确定了几种类黄酮。我们计划进行OMICS分析，以阐明与BA线粒体功能激活有关的细胞内机制。到目前为止，这项研究主要是使用原代培养的大鼠BA进行的，但是人们认为，将人类细胞系与丰富的数据库使用对OMICS分析有利。因此，使用人BA菌株A41BAT-SVF构建了一个测定系统。 UCP1蛋白的表达水平通过在BA分化诱导培养基中培养A41BAT-SVF来测量。结果，从分化的第14天诱导中观察到UCP1蛋白的表达水平显着提高。此外，当用姜提取物处理A41BAT-SVF时，观察到UCP1蛋白的表达水平显着升高，类似于原代培养的大鼠BA的表达水平。这表明使用A41BAT-SVF的测定系统可用于搜索促进BA线粒体功能的细胞内机制。