人工股関節周囲骨吸収像におけるODF及びOCIFの役割について

关于ODF和OCIF在人工髋关节周围骨吸收图像中的作用

• 批准号: 09771115
• 负责人: 千葉 純司
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771115/
• 关键词: 人工股関節; 骨吸収像; 活性化マクロファージ; ODF; OCIF; サイトカイン; RT-PCR法; 破骨細胞; 骨吸収; マクロファージ; M-CSF; Proto-oncogene c-fos; 膜様組織; Aseptic・loosening

(はじめに)人工股関節周囲の骨吸収像には、活性化マクロファージからのサイトカイン産生を介した機序が推測されている。最近になり,破骨細胞の誘導分化にはosteoclast differerentiation factor(ODF)が必要であり,破骨細胞形成を特異的に抑制するosteoclastogenesis inhibilory factor(OCIF)が重要な働きをしていることが判明してきた。そこで我々は、病変局所でのこれらサイトカインの遺伝子発現について、RT-PCR法を用いて検索を行い、ODF及び相反するOCIFの発現について検討を行った。(方法)症例は1996年より1998年までの間に当病院及び当病院の関連施設において人工股関節再置換術を施行した41症例で、術前の単純X線像にてFocal osteolysisを認めた12症例に限定した。人工股関節再置換術時に人工股関節周囲より採取した膜様組織においてのODF及びOCIFの各m-RNA発現をRT-PCR法を用いて検索した。手術時に採取した膜様組織から,Acid guanidine-phenol-cjloroform(AGPC)法によりtotal RNAを抽出した。抽出した1μgのtotaIRNAよりODFおよびOCIFのPriemerを用いて94℃30秒の変性,60℃30秒のアニーリング,72℃30秒の伸展を30回繰り返して上記の各comlimentary DNA(cDNA fragment)を増幅した。増幅したこれらの各cDNA fragmentをTBE緩衝液中でポリアクリルアミドゲルにて電気泳動し,ethidium bromide染色の後,写真を撮影し,ODFおよびOCIFの発現を検討した。(結果)RT-PCR法により検討を行った結果、450base pairにODF及び370 base pairにOCIFの発現を認めた。相対値は,1μgtotaIRNAを用いた時のODFおよびOCIFの増副産物の蛍光強度を0.1μgtotalRNAを用いたときのβ-actinの増副産物の蛍光強度で割った値であるが明らかにODFの発現量が増強していた。(結論)ODF,OCIFが人工股関節周囲の骨吸収像に深く関与している可能性が示唆された。

[は じ め に) artificial stock masato festival week 囲 の bone absorption 収 like に は, active マ ク ロ フ ァ ー ジ か ら の サ イ ト カ イ ン produce を interface し た machine sequence が speculation さ れ て い る. Recently, にな にな, osteoclast <s:1> induced differentiation に に osteoclast different differentiation factor(ODF)が necessary であ, osteoclast formation を specific に inhibition するosteoclastogenesis in inhibilory factor(OCIF)が important な <s:1> を を て る とが とが judgment て た た た. そ こ で I 々 は, illness - bureau で の こ れ ら サ イ ト カ イ ン の posthumous son 伝 発 now に つ い て, rt-pcr method を い て 検 cable line を い, ODF and び instead す る OCIF の 発 now に つ い て 検 line for を っ た. Cases (method) は 1996 よ り 1998 ま で の between に when hospital and び hospital の masato even facilities に お い て artificial stock masato section to execute し replacement を た 41 cases で, preoperative の 単 plain X-ray like に て Focal osteolysis を recognize め た 12 cases に qualified し た. Artificial masato section again when replacement に artificial shares masato festival week 囲 よ り take し た membrane others organization に お い て の ODF and び OCIF の each m - RNA 発 now を を rt-pcr method with い て 検 cable し た. During the operation, に た た membrane-like tissue た ら was taken, and the Acid guanidine-phenol-cjloroform(AGPC) method によ た total RNAを was extracted to た た. Spare し た 1 mu g の totaIRNA よ り ODF お よ び OCIF の Priemer を with い て の 94 ℃ for 30 seconds - sex, 60 ℃ for 30 seconds の ア ニ ー リ ン グ, 72 ℃ for 30 seconds stretch の を 30 back Qiao り return し て written の comlimentary DNA (cDNA fragment)を increase を た. Rights of し た こ れ ら の each cDNA fragments を TBE buffer in で ポ リ ア ク リ ル ア ミ ド ゲ ル に て 気 swimming し, ethidium bromide staining after の, pictorial を pinch of shadow し, ODF お よ び OCIF の 発 を now beg し 検 た. (results) rt-pcr method に よ り 検 line for を っ た results, 450 base pair に ODF and び 370 base pair に OCIF の 発 を now recognize め た. Phase numerical は seaborne, 1 mu gtotaIRNA を with い た when の ODF お よ び OCIF の raised by-products の 蛍 light intensity を 0.1 mu gtotalRNA を with い た と き の beta actin の raised by-products の 蛍 light intensity で cut っ た numerical で あ る が Ming ら か に ODF の 発 now quantity が raised strong し て い た. (Conclusion)ODF,OCIFが artificial femoral joint 囲 bone aspiration is closely related to に deep く and the possibility of <s:1> て る る が is が suggesting された.

项目成果

Chiba J.et al: "The role of i NOS in femoral osfeolysis after cementless total high arthroplasty" Joint Arthroplasty. 1. 55-64 (1998)

Chiba J.et al：“i NOS 在非骨水泥全高位关节置换术后股骨溶解中的作用”关节置换术。

Chiba,J.et al.: "The characterization of the cytokines in femoral osteolysis after cementless total hip arthroplasty." Clinical Orthopaedic and Related Research. 300. 304-312 (1994)

Chiba,J.et al.：“非骨水泥全髋关节置换术后股骨溶解中细胞因子的特征。”

Chiba,J.et al.: "The role of chemokine,adhesion molecules,and cytokine receptor in femoral osteolysis after cementless total hip arthroplasty." Transactions of Orthopaedic Research Society. 21. 514 (1996)

Chiba, J. 等人：“趋化因子、粘附分子和细胞因子受体在非骨水泥全髋关节置换术后股骨溶解中的作用。”

Chiba J.et al: "The characterization of the cytokineo in femoral osfeolysis after cementless total high arthroplasty" Clinical Orthopaedic and Related Research. 300. 304-312 (1994)

Chiba J.等人：“非骨水泥全高位关节置换术后股骨溶解中细胞因子的特征”临床骨科及相关研究。

Chiba,J.et al.: "Biochemical and morphological analyses of human macrophages activated by human red cells." Journal of Orthopaedic Rheumatology. 9. 217-221 (1996)

Chiba,J.et al.：“人类红细胞激活的人类巨噬细胞的生化和形态学分析。”