Modulares STED-Mikroskop inklusive Zweiphotonen-Anregung

包含双光子激发的模块化 STED 显微镜

• 批准号: 411346541
• 金额: --
• 依托单位: Universitätsklinikum Jena
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Major Research Instrumentation
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2018-12-31 至 无数据
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/411346541?language=en
• 关键词: Modulares; STED; Mikroskop; inklusive; Zweiphotonen

Das STED-Mikroskop ist für die präzise ortsaufgelöste Lokalisierung und Funktionsuntersuchungen von Membranrezeptoren (GPCR und Ionenkanäle) in lebenden Zellen und Gewebe im SFB "High-end microscopy elucidates membrane receptor function – ReceptorLight – Jena/Würzburg" vorgesehen. STED ist komplementär zu den langsamen SIM und dSTORM Methoden im SFB und erlaubt den gleichzeitigen Nachweis molekularer Wechselwirkungen über Förster Resonanz Energie Transfer (FRET). STED wird hier mit FLIM und Anisotropie-Messungen kombiniert und auf fluoreszierende Proteine (FP) als spezifische Marker in lebenden Zellen und Gewebe optimiert. Die modulare Konfiguration erlaubt STED-Methodenentwicklungen, um Photoschädigungen bei Langzeituntersuchungen zu minimieren. Optimierung der erreichbaren Ortsauflösung unterhalb der Beugungslimits mittels ISM-STED und MED-STED ist insbesondere für FPs essentiell. STED-FCS wird für die Verkleinerung des konfokalen Volumens für mikromolare Ligandenkonzentrationen benötigt. Variable Laseranregung ist für neue Fluoreszenzmarker an Agonisten der Rezeptoren notwendig, und Zweiphotonen-Anregung für Gewebemessungen als auch für maximalen Anisotropie-Kontrast bei homoFRET. Ein solches STED-Mikroskop ist weder in Jena noch an anderen Orten (national und international) zugänglich.

Das STED-Mikroskop ist für die präzise ortsaufgelöste Lokalisierung und Funktionsuntersuchungen von Membranrezeptoren（GPCR und Ionenkanäle）in lebenden Zellen und Gewebe im SFB“High-end microscopy elucidates membrane receptor function - ReceptorLight - Jena/Würzburg”vorgesehen. STED ist komplementär zu den langsamen SIM und dSTORM Methoden im SFB und erlaubt den gleichzeitigen Nachweis molekularer Wechselenkungen über Förster Resonanz Energie Transfer（FRET）. STED将FLIM和各向异性测量结合起来，并将荧光蛋白（FP）作为一种特异性标记物，用于生命周期的优化。模块化配置是STED-方法的改进，用于最小化长时间成像。对ISM-STED和MED-STED中的Beugungslimits进行优化是FP的必要条件。STED-FCS wird für die Verkleinerung des konfokalen Volumens für mikromolare Ligandenkonzentrationen benötigt. Variable Laseranregung ist für neue passizenzmarker an Agonisten der Rezeptoren notwendig，und Zweiphotonen-Anregung für Gewebemessungen als auch für maximalen Anisotropie-Contrast bei homofRET. Ein solches STED Mikroskop ist weder in Jena noch an anderen Orten（national und international）zugänglich.