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肺腺癌の悪性化に関わるECT2の検討

ECT2与肺腺癌恶变相关的检测

基本信息

批准号：
15H00604
负责人：
村田佳彦
金额：
$ 0.38万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H00604/
关键词：
ECT2

项目摘要

1. 研究目的本研究では、ECT2の細胞質への発現と悪性化との関連性について検討した。2. 研究方法(1)2000年から2010年までに筑波大学附属病院で外科的に手術された66例について、ホルマリン固定パラフィン包埋ブロックを用いて免疫染色を行った。(2)上記期間の症例のうち、新鮮凍結検体がある4例に対して、RNAシークエンスを行い、ECT2遺伝子の遺伝子変異の有無を調べた。(3)肺腺癌細胞株を用いて、核と細胞質を分離し、それぞれから蛋白を抽出した。ECT2高発現細胞株を同定しECT2との結合タンパクや下流の経路の活性化の状態についてCo-immunoprecipitation(Co-IP)を用いて検討した。3. 研究成果(1)ECT2の細胞質への発現は、N因子、pStage、v因子、1y因子、組織亜型、喫煙歴と関連を認め、5年生存率とも相関した。(2)肺腺癌症例4例に対して、ECT2の全exon領域に対してシークエンス解析を行ったが、遺伝子変異は検出されなかった。(3)(2)において、遺伝子変異が検出されなかったため、肺腺癌細胞株を用いて核と細胞質におけるECT2の発現を確認した。Calu-3、A549、RERF-LC-KJにおいて細胞質におけるECT2の高発現を確認した。さらに、Co-IPを用いて、細胞質におけるECT2とPKCiとの結合を確認した。また、ECT2の下流シグナルであるErk1, 2やMek1, 2を活性化していることがわかった。

1. Objective the purpose of this study is to study the relationship between sex and sex in the cells of ECT2. two。 Research methods (1) from 2000 to 2010, 66 patients in the Department of surgery of the affiliated Hospital of the University of Tsukuba were treated with immunostaining. (2) during the last memory period, there were 4 cases of dysphagia, 4 cases of new dysphagia, 4 cases of dysphagia, and 4 cases of dysphagia in the last period. (2) during the last period, there were 4 cases of dysphagia, 4 cases of dysphagia, and 4 cases of dysphagia. (2) during the last period of memory, there were 4 cases of dysphagia, 4 cases of dysphagia, 2 cases of dysphagia and 4 cases of dysphagia. (3) the lung adenocarcinoma cell line was isolated by cell culture, nuclear cell isolation and protein extraction. The cell lines of ECT2 high-yield cells were the same as those of ECT2-positive cells, and the downstream cells were activated. The status of Co-immunoprecipitation (Co-IP) was determined. 3. The results of the study were as follows: (1) ECT2 cell cycle, N factor, pStage, v factor, 1y factor, tissue type, tumor necrosis rate and 5-year survival rate were correlated with each other. (2) there were 4 cases of lung adenocarcinoma, and 4 cases of lung adenocarcinoma were diagnosed by ECT2 in the field of exon. (3) (2) the cell lines of lung adenocarcinoma and lung adenocarcinoma were confirmed by ECT2. Calu-3, A549, RERF-LC-KJ