PESI/MS/MSによる血液中シアン化物の超迅速スクリーニング分析法の構築

点击翻译按钮获取中文摘要

シアン化物は強い毒性を示すことから法中毒分野において、古くから重要な分析対象物である。さらに昨今、シアン化物の見逃し事案などが発生したことから、血中シアン化物のスクリーニング分析の重要性が高まっている。シアン化物の分析には様々な方法が報告されているが、これらの方法では、前処理操作の煩雑さや分析時間の長さの問題、さらにはチオシアン酸の影響を考慮する必要がある。そこで本研究では、タウリンおよび2,3-naphtalenedicarboxaldehyde(NDA)による血中シアン化物直接誘導体化法を用いた探針エレクトロスプレータンデム質量分析(PESI/MS/MS)による血中シアン化物誘導体の超迅速スクリーニング分析法の構築を試みた。ヒト血液にシアン化物を添加したものを分析試料とした。分析試料にタウリン水溶液及びNDA溶液を加え、室温下で反応させた。その後、内部標準溶液を添加し、専用のサンプルプレートに15μLを滴下し、PESI/MS/MSによる分析を行った。誘導体化反応時間について、1～30分で検討した結果、反応は10分でプラトーに達したため、反応時間を室温10分とした。本誘導体化条件を用いて200ng/mL(中毒濃度)及び2500ng/mL(致死濃度)の血中シアン化物に対してPESI/MS/MSで測定した結果、0.5分で何れの濃度においても良好に検出可能であった。そこで100～2500ng/mlの範囲で検量線を作成した結果、R^2>0.99の良好な直線性が得られ、スクリーニング検査と同時に中毒程度も定量的に判定可能であることが示された。以上の結果から、本法が血中シアン化物の簡便かつ超迅速スクリーニング法として極めて有用であると示唆された。