糖尿病性腎症における末梢単球中マイクロRNAの発現とその病態的意義の解明

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[研究目的]糖尿病性腎症は、毎年人工透析導入例が増加してきており、大きな問題となっている。その治療や予後予測には、良好な疾患感受性検査マーカーが求められている。糖尿病性腎症の発症や増悪には多くの因子が関与しているが、単球由来炎症関連分子群の関与が重要視されている。一方、マイクロRNA(miRNA)は翻訳レベルでタンパク質の発現を制御している短いnon-codingのRNAであり、ヒト遺伝子1/3以上の発現を幅広く制御していると推測されている。マイクロRNAの病態的意義については、現在、多方面で研究が進んでいるところである。特に、罹患率の高い疾患においてその役割が明らかになれば、臨床検査医学上有益な検査マーカーとなりうる可能性が生まれ、分子標的として創薬の対象となりうる。本研究では、糖尿病性腎症を伴う2型糖尿病と伴わない2型糖尿病症例の末梢単球において、糖尿病性腎症の進展をよく反映するマイクロRNAの網羅的な解析を行った。[研究計画]糖尿病性腎症を合併しその進展度に応じて層別化された1型糖尿病と合併症を伴わない1型糖尿病を対象として静脈血を採取し、免疫磁気ビーズ法を用いて単球を単離した。得られた単球よりtotal RNAを抽出後、miRNAを濃縮・精製し、mirVanaTM miRNA Labeling Kit(Ambion)を用いてマイクロアレイ解析用のサンプルを調整した。このサンプルを既知のヒト、マウス、ラットのmiRNAの包括的なパネルに対応するプローブをスポットしたマイクロアレイmirVanaTM miRNA Bioarrays(Ambion)とハイブリダイズさせた。これをスキャナーで取り込み、糖尿病症例間のmiRNA発現を比較解析し、糖尿病性腎症感受性miRNAを抽出した。[研究結果]合併症を伴わない1型糖尿病患者に比し糖尿病性腎症を合併した1型糖尿病患者において発現が増強していたmiRNAはhsa_miR_140、hsa_miR_384、hsa_miR_510、hsa_miR_519c、発現が減少していたmiRNAはhsa_miR_150、hsa_miR_16、hsa_miR_21、hsa_miR_223、hsa_miR_5l4であった。今後例数を増やしてさらに検討する必要があるが、これらのマイクロRNAが糖尿病性腎症の進展を反映している可能性が示唆された。