生体試料中睡眠薬のスクリーニング並びに定性/定量分析の迅速化に関する研究

生体試料(尿、血液、臓器等)中の睡眠薬の分析は、事件の真相解明への大きな手助けとなるため、殺人、レイプ及び昏睡強盗等の重要犯罪事案をはじめとして、鑑定嘱託される件数は非常に多く、そのうえ緊急を要するケースが多いため、迅速でスクリーニング的に行える検査法が強く求められている。本研究の目的は、わが国で流通する全ての睡眠薬及びその代謝物(抱合体を含む計80種類以上)を対象として、1時間以内にスクリーニングから定性及び定量が可能となる分析システムを構築することであった。今回の分析法構築に際し、分析機器(LC-MS-MS)としては、アプライドバイオシステムズ社製API Q TRAP 3200を用いた。分析対象とした睡眠薬及び抱合体を除く代謝物(計70種程度)については、標準品を用いてMS-MS条件を最適化し、プロダクトイオンスペクトル-ライブラリを構築した。トリアゾラム、エチゾラム、ブロチゾラム、アルプラゾラム、ブロマゼパム及びオキサゼパム等の睡眠薬成分のように、ほとんどが抱合代謝物として尿中から排泄されるようなものについては、実際の使用者尿を用いて、MS-MS条件の最適化を実施した。これら薬物/代謝物の抽出条件を検討したところ、メタノールによる除タンパク処理法により、抱合代謝物を含め、良好な分析結果が得られた。抽出及び濃縮操作の所要時間は概ね20分程度、LC-MS-MSによる分析及び解析に要する時間は1検体約30分程度となった。本研究で確立した分析法により、約80種類の薬物/代謝物を分析対象として、1時間以内に検査することが可能となった。但し、フルラゼパム及びプラゼパム等数種の睡眠薬の抱合代謝物については、MS-MS条件の最適化が未実施のため、ヒト肝ミクロゾーム等を用いたin vitroでの合成を行い、随時プロダクトイオンスペクトル-ライブラリに追加していく予定である。

生体試料(尿、血液、臓器等)中の睡眠薬の分析は、事件の真相解明への大きな手助けとなるため、殺人、レイプ及び昏睡強盗等の重要犯罪事案をはじめとして、鑑定嘱託される件数は非常に多く、そのうえ緊急を要するケースが多いため、迅速でスクリーニング的に行える検査法が強く求められている。本研究の目的は、わが国で流通する全ての睡眠薬及びその代謝物(抱合体を含む計80種類以上)を対象として、1時間以内にスクリーニングから定性及び定量が可能となる分析システムを構築することであった。今回の分析法構築に際し、分析機器(LC-MS-MS)としては、アプライドバイオシステムズ社製API Q TRAP 3200を用いた。分析対象とした睡眠薬及び抱合体を除く代謝物(計70種程度)については、標準品を用いてMS-MS条件を最適化し、プロダクトイオンスペクトル-ライブラリを構築した。トリアゾラム、エチゾラム、ブロチゾラム、アルプラゾラム、ブロマゼパム及びオキサゼパム等の睡眠薬成分のように、ほとんどが抱合代謝物として尿中から排泄されるようなものについては、実際の使用者尿を用いて、MS-MS条件の最適化を実施した。これら薬物/代謝物の抽出条件を検討したところ、メタノールによる除タンパク処理法により、抱合代謝物を含め、良好な分析結果が得られた。抽出及び濃縮操作の所要時間は概ね20分程度、LC-MS-MSによる分析及び解析に要する時間は1検体約30分程度となった。本研究で確立した分析法により、約80種類の薬物/代謝物を分析対象として、1時間以内に検査することが可能となった。但し、フルラゼパム及びプラゼパム等数種の睡眠薬の抱合代謝物については、MS-MS条件の最適化が未実施のため、ヒト肝ミクロゾーム等を用いたin vitroでの合成を行い、随時プロダクトイオンスペクトル-ライブラリに追加していく予定である。