共焦点レーザー走査型顕微鏡および酵母菌を使った生態親和性評価法の開発

共焦激光扫描显微镜和酵母生态相容性评价方法的开发

• 批准号: 21915022
• 负责人: 松本 朋子
• 金额: $ 0.33万
• 依托单位: University of Miyazaki
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21915022/
• 关键词: 共焦点レーザー走査型顕微鏡; 水溶性ポルフィリン; 吸光光度定量分析法

生体試料と薬剤との相互作用は、生体現象の解明等において重要である。生体試料の観察には共焦点レーザー走査型顕微鏡(CLSM)が従来、汎用的に使用されている。そこで、私は薬剤の生体親和性評価として、CLSMを用いる吸光光度定量分析法の開発を目的に研究を行った。最初に、水溶性のメトキソ(アルキルオキソ)テトラフェニルポルフィリナトアンチモン臭化物錯体(1)をモデル発色団に,モデル細胞として酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)を用いて吸着実験を行った.次に、CLSMを用いた顕微吸光光度分析によって、1の酵母菌への吸着量を測定した.菌体水溶液を試験管に採取し,1水溶液を試験管に加え,菌体のブラウン運動を止めるために寒天を加えた。調製した1(10μmol dm^<-3>)および酵母菌(1.0×10^4 cells cm^<-3>),寒天(0.4wt%)を含む水溶液を,スライドガラス上に置かれた1辺1cmの口の字型シリコーン製スペーサーに適当量を採取し,カバーガラスで覆いCLSMのステージに固定した.60倍の対物レンズで設定した直径1.42μmの測定領域を約5μmの菌体の中心線上に合わせ,1の極大波長の554nmでの吸光度および菌体粒径を測定して,Lambert-Beer則による吸光光度分析によって菌体内濃度を決定した.1は菌体外濃度10μMに対して、22.5～54.2mMの吸着濃度を示し、高い生体親和性が示された.さらに、1のジオキサンおよび水に対する溶解度C_oおよびC_wを測定し、それぞれ親油性および親水性のパラメーターとした。その結果、吸着量はC_oと良い相関を示した。このことは、1の脂溶性が高まるほど、脂溶性の酵母の細胞壁を通過しやすく、菌体内に多く吸着することを示している。これらのことからCLSMを用いる吸光光度分析は,薬剤の生体親和性評価として活用できることを確認した。

The interaction between biological samples and organic substances is important for understanding biological phenomena. The confocal microscope (CLSM) for biological sample observation is used in both conventional and general applications. Study on the development of absorbance quantitative analysis method for the determination of biological affinities of the two compounds Initially, water soluble compounds (1) were used in the development of color, and the adsorption of microorganisms by Saccharomyces cerevisiae was carried out. In addition, CLSM was used to determine the sorption capacity of yeast in microabsorbance analysis. The bacteria aqueous solution is taken from the test tube, and the bacteria aqueous solution is added to the test tube. Modulation &lt;$&lt;$1 (10μmol dm^<-3>) yeast (1.0×10^4 cells cm^<-3>), cold weather (0.4wt%) The aqueous solution containing chlorine is set at the top of the measurement range and the absorbance at the maximum wavelength of 1 cm is measured at the center line of the cell with the maximum wavelength of 554nm. Lambert-Beer absorbance analysis was used to determine the in vivo concentration of the bacteria. 1. The in vitro concentration of the bacteria was 10μM, the sorption concentration was 22.5~ 54.2 mM, and the high in vivo affinity was shown. In addition, the solubility C_o and C_w of 1 inch of cellulose and water were measured, which provides a basis for both lipophilic and hydrophilic properties. The results show that C_o and C_o are good correlations. The cell wall of the fat-soluble and fat-soluble yeasts passes through the cell wall, and the cell wall of the fat-soluble yeasts adsorbs more than once. The use of CLSM in the determination of biological affinity of the compound

项目成果

共焦点レーザー走査顕微鏡による生体親和性色素の評価

使用共焦激光扫描显微镜评估生物相容性染料

• 发表时间: 2010
• 作者: M.Yasuda;T.Nakahara;T.Matsumoto;T.Shiragami;J.Matsumoto;H.Yokoi;T.Hirano;K.Hirakawa,;松本朋子
• 通讯作者: 松本朋子

Visible light-assisted sterilization activity of water-soluble antimonyporphyrin toward Saccharomyces cerevisiae

• DOI: 10.1016/j.jphotochem.2009.05.007
• 发表时间: 2009-06
• 期刊: Journal of Photochemistry and Photobiology A-chemistry
• 影响因子: 4.3
• 作者: M. Yasuda;T. Nakahara;Tomoko Matsumoto;T. Shiragami;Jin Matsumoto;H. Yokoi;T. Hirano;Kazutaka Hirakawa

共焦点レーザー走査型顕微鏡による酵母菌体へ吸着したポルフィリン誘導体の定量

使用共焦激光扫描显微镜定量吸附到酵母细胞上的卟啉衍生物

• 发表时间: 2009
• 作者: M.Yasuda;T.Nakahara;T.Matsumoto;T.Shiragami;J.Matsumoto;H.Yokoi;T.Hirano;K.Hirakawa,;松本朋子;松本朋子
• 通讯作者: 松本朋子