抗リン脂質抗体症候群におけるLA混合試験の標準化

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【研究目的】抗リン脂質抗体症候群の診断に用いられるループスアンチコアグラント(LA)測定は、用いる試薬、正常血漿や測定条件によって結果が大きく異なることが問題となっている。従来、混合試験(Mixing test : MT)に使用する正常血漿は、健常者の血液を遠心、フィルター処理し、血小板除去血漿を作製し使用してきた。今回MT用の市販正常血漿の使用が判定結果へ与える影響を検討し標準化することを目的とする。【研究方法】1)市販正常血漿の評価:正常血漿には、混合試験用正常血漿「RD」(R血漿)、CRYOcheck Pooled Normal Plasma(P血漿)、自家製プール血漿(H血漿)の3種類を用いた。測定試薬はKCT、dRVVT、PTT-LAを用いた。検体およびH血漿は遠心後フィルター処理を行った。MTは混合比100、50、0%の3ポイントで行い、LA陽性強度の評価にはRosner Index(RI)[100×(50%血漿-0%血漿)/100%血漿]を用いた。2)検体処理方法の影響:患者検体の血小板除去方法を3条件[1回遠心(2,000g、15分)、2回遠心(2,000g、15分を繰り返す)、フィルター処理(2,000g、15分遠心後フィルター処理)]とし、市販正常血漿を用いてMTを行った。【研究成果】1)LA陽性症例のMTでは3種類の正常血漿間でPTT-LAおよびdRVVT-screenでは有意差は見られなかったが、KCTではR血漿vs. P血漿間およびP血漿vs. H血漿間に有意差が見られた(それぞれp<0.01、p<0.05)。したがって、PTT-LAおよびdRVVTを用いたLA測定ではいずれの正常血漿も使用可能と考えられた。2)PTT-LAのMTでは、R血漿を用いた場合フィルター処理後有意にRIが高くなったが、P血漿、H血漿では各血小板除去処理間で有意差が見られなかった。