ニューモシスチス肺炎の迅速診断のための定量的PCR法の確立

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【目的】ニューモチスチス肺炎(PCP)は進行が急速なことも多く、早期診断が重要である。Pneumocystis jirovecii (P. jirovecii)の定量的PCR法を構築し、PCPの迅速診断・治療に役立てたい。【方法】2010年8月～2012年12月に提出のPCP疑い患者呼吸器検体26検体の核酸を抽出。TaqManプローブ法で定量PCRを行い、Internal transcribed spacer (ITS)2、KEXI(セリンエンドペプチダーゼ)及びMulti surface protein gene (MSG)の各領域について検討、β-Dグルカンの値とも比較。患者検体は個人情報の管理等、倫理面に十分配慮して取り扱った。【結果・まとめ】ITS2の定量PCRの結果を、既報のカットオフ値(1.5×10^3コピー/ml)を参考に陽性、陰性を判定した。ITS2陽性11検体(11件中10件は臨床的にPCP)の平均値は3.3×10^4コピー/ml、そのKEXIの平均値は2.0×10^4コピー/mlと両者の相関は良好(相関係数:0.9564)だった。MSGはsingle copyでないため、同検体の結果はITS2やKEXIに比べて高値(平均値:4.0×10^5コピー/ml)だった。病理検査でP. jirovecii陽性となった検体はなかった。Housekeeping geneを用いた定量結果の補正は今回できなかったため、今後の課題である。β-Dグルカン検査は、その結果が高値であったことからPCPの診断へとつながる場合もあり、重要な検査の一つであると考えられた。PCP診断において、定量的PCR法によるP. jiroveciiの検出は、迅速に実施でき有用であると考えられた。しかし、PCP診断症例数はまだ少なく、判定保留範囲を設けるべきかどうか等も含め、更なる検討が必要と考えられた。