新規組織透明化技術を応用した教育用透明臓器標本の作製

使用新的组织透明技术生产用于教育目的的透明器官标本

• 批准号: 25930028
• 负责人: 三谷 真弓
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Kanazawa Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-25930028/
• 关键词: 透明標本; 血管注入; 教材開発

【研究目的】解剖学の学習において、教科書の図では臓器内の血管の立体的な広がりを把握することは大変難しい。本研究では、申請者が所属する研究室で開発された組織透明化技術を用いて、血管に色素を注入したマウス臓器の透明化を行い、学習効果の高い解剖学教材の開発を目的とした。【研究方法】全身の血管を描出するために、麻酔下にマウス成獣の左心室からEDTA加生理食塩水で還流したのちに、希釈した黒色インクを注入した。インクは、筆記用具あるいはプリンター用として一般に市販されているものを流用した。インク注入後に、脳、肝臓、腎臓、骨格筋など各臓器を摘出し、組織透明化処理(特許出願のため非公開)を行った。動物実験は金沢医科大学動物実験委員会の承認を受けた。【研究成果】今回用いたカーボン系および顔料系インクは希釈時に凝集しやすく、凝集塊が大きい場合は血管の目詰まりを引き起こすため微小血管の描出は困雜であった。一方、超音波洗浄機にかけながら希釈した後に、顕微鏡下で凝集塊が破砕されていることを確認したインクを用いた場合、毛細血管を超えて静脈層まで描出することが可能であった。このことから、インクの調整に超音波処理が有効であることが確認された。大脳では、髄膜から内部に侵入する血管が大脳皮質内で枝針のように分枝する様が観察された。腎臓では、輸入細動脈、糸球体、輸出細動脈が非常に明瞭に観察された。皮膚を剥離した上腕を観察したところ、上腕動脈の枝が筋束に枝を出すとともに、栄養血管が上腕骨に侵入している像が観察された。肝臓については、肝動脈の詳細な分布を確認することができたが、類洞を描出することはできなかった。このように、ホールマウント標本の深部の血管走行を観察することができた。当初に計画していたホールマウント免疫染色標本の透明化については、免疫染色条件を決定することができず、今後の課題となった。

[Research Purpose] The study of anatomy and the three-dimensional study of the blood vessels in the textbook are difficult and difficult. This research is based on the application of tissue clearing technology and vascular pigments developed by the applicant's affiliated laboratory. The transparency of the injector and the high learning effect of the anatomy textbook are the purpose of the injection. [Research method] The blood vessels of the whole body are drawn out, and the left ventricle of the left ventricle is drawn under the numbness. EDTA is added to the physiological diet, and the water is still flowing, and the water is injected into the water.インクは, note-taking equipment あるいはプリンター用としてGenerally available in the market されているものを流用した. After the injection, the liver, kidneys, liver, kidneys, and bone tissue were extracted and processed for tissue transparency (non-disclosure under license). The animal laboratory is approved by the Animal Laboratory Committee of Kanazawa Medical University. [Research results] This time, I used the いたカーボン system および pigment system インクは西釈时に agglomeration しやすく, agglomeration The large and small blood vessels are lumped together and the small blood vessels are drawn out. On the one hand, the ultrasonic cleaning machine is used for cleaning, and the agglutination block is broken under the microscope, and the agglutination block is broken under the microscope. It is possible to use the capillary ultrasonic venous layer and outline the capillary venous layer.このことから、インクの AdjustmentにUltrasonic treatmentがeffectiveであることがconfirmationされた. The inside of the skin is invaded, the blood vessels are invaded, and the branches are branched into the cortex of the skin. The renal function, afferent arteriole, glomerulus, and efferent arteriole are very clearly understood. The skin is peeled off and the upper wrist is inspected, the branches and tendons of the upper carpal artery are peeled off, and the vasculature of the upper wrist is invaded and the upper carpal bone is invaded. The details of the distribution of the hepatic artery, the hepatic artery, and the detailed distribution of the hepatic artery are confirmed.このように, ホールマウントspecimen のdeep vascular course を観看することができた. The original plan was to clear the immunostained specimens, determine the immunostaining conditions, and plan the future projects.