リポ多糖(LPS)によるマウスマクロファージ及び線維芽細胞の活性比に関する研究

脂多糖（LPS）对小鼠巨噬细胞和成纤维细胞活性比值的研究

• 批准号: 08770198
• 负责人: 冨永 薫
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770198/
• 关键词: リポ多糖; マクロファージ; MAPキナーゼ; NF-κB

昨年度我々が作製したLPS応答性胎児線維芽細胞株(MEF.He)およびLPS低応答性胎児線維芽細胞株(MEF.HeJ)を、LPSを含む種々の刺激物質で刺激し、IL-6の発現を指標に、両細胞株の応答性を調べた。MEF.He細胞株では、LPSのみならずマウスマクロファージにおいてLPSと同様な作用を示すことが明らかとなっているタキソ-ルや細胞内セカンドメッセンジャーの一つであるセラミドに応答してIL-6mRNAを発現した。一方、MEF.HeJ細胞株では、LPSのみならずこれらの刺激に不応答で、IL-6mRNAを発現しなかった。陽性コントロールのIL-1α刺激では、両細胞株共に応答し、IL-6mRNAを発現した。MEFは、マクロファージに発現し、LPSレセプターの一つであると考えられているCD14分子を発現していないので、CD14を介さないLPSシグナル伝達系の存在が示唆された。また、チロシンキナーゼ阻害剤を用いた実験から、MEF.HeにおけるLPSシグナル伝達系にもチロシンキナーゼが関与することを明らかにし、MEFのLPSシグナル伝達系はマクロファージのそれと共通性が高いことが示唆された。LPSで細胞を前処理すると、2回目のLPS刺激に対して著しく不応答になることが知られており、LPSトレランスとよばれている。マウス腹腔マクロファージを用い、LPSトレランス状態にある細胞のLPSシグナル伝達系を調べた。LPSレランスマクロファージでは、3種のMAPキナーゼ(MAPK,p38,JNK)全ての活性化が抑制されていた。また、MAPKの上流に位置するキナーゼであるRaf-1の活性化も抑制されており、これらMAPキナーゼファミリーの上流のキナーゼがLPSトレランスでは抑制されることを明らかにした。またLPS刺激により活性化される重要な転写因子NF-κBの活性化もLPSトレランスマクロファージでは抑制されていた。以上の結果は、LPSトレランスがLPSシグナル伝達系を構成するかなり上流に位置する分子の抑制により引き起こされることを強く示唆していた。

Last year I 々 が cropping し た LPS 応 tire where a sex line d bud cell lines (MEF) He) お よ び LPS low 応 tire where a sex line d bud cell lines (MEF) HeJ research institute) を, LPS を む 々 species. の material で stimulate し, IL - 6 の 発 に を index, struck cell lines の 応 a sexual を adjustable べ た. MEF. He cell lines で は, LPS の み な ら ず マ ウ ス マ ク ロ フ ァ ー ジ に お い て LPS と with others を な role す こ と が Ming ら か と な っ て い る タ キ ソ - ル や intracellular セ カ ン ド メ ッ セ ン ジ ャ ー の a つ で あ る セ ラ ミ ド に 応 answer し て IL - 6 mrna を 発 now し た. Side, MEF. HeJ research institute cell lines で は, LPS の み な ら ず こ れ ら の stimulus に 応 not answer で, IL - 6 mrna を 発 now し な か っ た. Positive コ トロ トロ トロ トロ トロ <s:1> <s:1> IL-1α stimulation で で, two cell lines co-に 応 respond to <s:1>, IL-6 mrna を shows た た. MEF は, マ ク ロ フ ァ ー ジ に 発 し, LPS レ セ プ タ ー の a つ で あ る と exam え ら れ て い る CD14 molecular を 発 now し て い な い の で, CD14 を dielectric さ な い LPS シ グ ナ ル 伝 is の exist が shinar sucking さ れ た. ま た, チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ resistance against tonic を い た be 験 か ら, MEF. He に お け る LPS シ グ ナ ル 伝 da system に も チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ が masato and す る こ と を Ming ら か に し, MEF の LPS シ グ ナ ル 伝 da system は マ ク ロ フ ァ ー ジ の そ れ と high convergence が い こ と が in stopping さ れ た. LPS で cells before を 処 him す る と, 2 pa2 の LPS stimulation に し seaborne て the し く 応 not answer に な る こ と が know ら れ て お り, LPS ト レ ラ ン ス と よ ば れ て い る. マ ウ ス abdominal マ ク ロ フ ァ ー ジ を い, LPS ト レ ラ ン ス state に あ る cells の LPS シ グ ナ ル 伝 da system を adjustable べ た. LPS レ ラ ン ス マ ク ロ フ ァ ー ジ で は, three の MAP キ ナ ー ゼ (MAPK, p38 lightning, JNK) all て の activeness が inhibit さ れ て い た. ま た, MAPK の upper position に す る キ ナ ー ゼ で あ る Raf - 1 の activeness も inhibit さ れ て お り, こ れ ら MAP キ ナ ー ゼ フ ァ ミ リ ー の upper の キ ナ ー ゼ が LPS ト レ ラ ン ス で は inhibit さ れ る こ と を Ming ら か に し た. ま た LPS stimulation に よ り activeness さ れ る important な planning write factor nf-kappa B の activeness も LPS ト レ ラ ン ス マ ク ロ フ ァ ー ジ で は inhibit さ れ て い た. の above results は, LPS ト レ ラ ン ス が LPS シ グ ナ ル 伝 da system を constitute す る か な り upper に position す る molecular の inhibit に よ り lead き up こ さ れ る こ と を く and shown strong sucking し て い た.