Leukotoxinによる急性肺血管内皮傷害の分子生物学的機序に関わる研究

白细胞毒素致急性肺血管内皮损伤的分子生物学机制研究

• 批准号: 08770427
• 负责人: 飴島 慎吾
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770427/
• 关键词: Leukotoxin; ヒト肺動脈内皮細胞; superoxide(O_2^-); xanthine oxidase阻害剤; アポトーシス; DNAラダー; 内皮細胞傷害

1.Leukotoxin(Lx)により誘導される内皮細胞内O_2^-の起源ヒト肺動脈内皮細胞(HPAEC)内に生成されるO_2^-を蛍光法は濃度依存性を用いて測定した。Lxは濃度依存性にO_2^-を誘導するが、xanthine oxidase阻害剤(alloprinol)により、50%以上抑制された。一方、NADPH oxidase阻害剤(apocynin)では抑制されなかった。2.Lxによる内皮細胞傷害(1)Lx(10^<-6>〜10^<-4>M)は濃度依存性、時間依存性にHPAECの細胞傷害(^<51>Cr release assay)を起こし、これはalloprinolにより抑制された。形態学的観察(0〜48時間)でも、付着HPAECは濃度および時間依存性にroundingを起こし、その後細胞死を認めた。10^<-4>Mを越えるLx濃度ではCell lysisの影響が現れた。(2)TUNEL法による観察では、10^<-6>〜10^<-5>MのLxで濃度依存性にTUNEL細胞の増加を認めた。また、DNAのアガロースゲル電気泳動では、コントロール群と比べ、Lx10^<-6>〜10^<-5>Mの投与群で有意にDNAラダーを認めた。10^<-4>M以上のLx投与群では、DNAラダーを認めなかった。以上のことより、比較的低濃度のLxがHPAECに対しアポトーシスを誘導している可能性が示唆された。3.まとめLxによる内皮細胞傷害の機序として、Cell lysis以外に、その比較的低濃度では、アポトーシスの誘導も関与しており、それには主としてxanthine oxidase系由来のO_2^-の誘導を介した機序が推察される。

1. Leukotoxin (Lx) に よ り induced さ れ る endothelial cells O_2 ^ - の origin ヒ ト に within the pulmonary artery endothelial cells (HPAEC) generated さ れ る O_2 ^ - を 蛍 は concentration dependence を light method with い て determination し た. Lx <s:1> concentration dependence にO_2^-を induction するが, xanthine oxidase inhibitor (alloprinol)によ, more than 50% inhibition された. One side, NADPH oxidase inhibitor (apocynin)で で inhibits されな った った った. 2. Lx に よ る endothelial cell injury (1) the Lx (10 ^ < - > 6 ~ 10 ^ < - > 4 M) は concentration dependence and time dependence に HPAEC の cell damage (^ < > 51 Cr release assay) を up こ し, こ れ は alloprinol に よ り inhibit さ れ た. Morphological 観 observation (0-48 time)で で, followed by HPAEC <s:1> concentration および time dependence にroundingを onset of <s:1> を, そ followed by cell death を recognition めた. 10^< − 4>Mを over えるLx concentration で Cell lysis affects が to れた. (2) the TUNEL method に よ る 観 examine で は, 10 ^ < - > 6 ~ 10 ^ < - > 5 M の Lx で concentration dependence に の raised を requirement by TUNEL cells to recognize め た. ま た, DNA の ア ガ ロ ー ス ゲ ル electric 気 swimming で は, コ ン ト ロ ー と ル group than べ, Lx10 ^ < - > 6 ~ 10 ^ < - > 5 M の cast and group of で intentionally に DNA ラ ダ ー を recognize め た. Above 10^<-4>M, <s:1> Lx inoculate groups で and DNAラダ を を を recognize めな めな った った. Above の こ と よ り, comparison of low concentration の Lx が HPAEC に し seaborne ア ポ ト ー シ ス を induced し て い が る possibility in stopping さ れ た. 3. ま と め Lx に よ る endothelial Cell damage の machine sequence と し て, Cell lysis に, そ の comparison of low concentration で は, ア ポ ト ー シ ス の induced も masato and し て お り, そ れ に は main と し て xanthine oxidase system origin の O_2 ^ - induced を の interface し た machine sequence が push examine さ れ る.