核磁気共鳴を利用した放射線誘発アポトーシス生体内検出の基礎的研究

核磁共振体内检测辐射诱导细胞凋亡的基础研究

• 批准号: 08770711
• 负责人: 伊藤 猛
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770711/
• 关键词: 放射線誘発アポトーシス; ^<31>P-MRS(Magnetic Rescunce Spectroscopy)

最初に,我々の教室で継代培養しており,経験が豊富なC3H/HeNマウス乳癌由来のFM3A細胞を用いることとし,同細胞を同型雄性マウス大腿部に移植し,実験用の6.3TNMR装置で31P-magnetic Resonance spectroscopy(以下MRS)を測定した.このとき,通常放射線照射による分裂死が起こるとされる24時間に達するかなり前にあたる照射後8時間でMRSの測定を行い各ピーク値の強度を測定したところ,20Gy照射時ではPi/β-NTPratio,PME/β-NTPratioの一過的な変動が観測されたが,個体間でばらつきが大きく,一定の傾向としてまとめることはできなかった.また40Gy照射後でも同じような変化が観測された.この現象は間期死であるアポトーシスによる変化である可能性と推測したが,この細胞系は放射線感受性が比較的低く,アポトーシスのモデルとしては不適当であったのではないかと考え,続いて放射線誘発アポトーシスを起こしやすいことが知られているヒト白血病由来Molt-4細胞を使用して実験を行うこととした.この細胞を1,2,4Gy照射したあとエリスロシンBで染色し,Die exclusion testでアポトーシス細胞の計測した.やく8時間で20〜40%の細胞が死ぬことが確認された.これはMRSで変化が観測された時間と近い値である.続いて同細胞をマウスに移植してMRSを測定しようとしたが,この細胞系はヒト由来であり,ヌードマウスでも移植が思うように行かず,MRSの測定までいたらなかった.今後の研究としては,単離細胞のままMRSを測定する工夫をこらすか,あるいはFM3A細胞に抗ガン剤などのModulatorを併用してアポトーシスを起こしやすくするなどの方法が考えられ,研究を継続する予定である.

Initial に, I 々 の classroom で 継 generation develop し て お り, 経 験 が aboundant な of C3H/HeN マ ウ ス breast origin の FM3A cells を using い る こ と と し, type with cell を with male マ ウ ス big leg し に transplantation, be 験 use の 6.3 TNMR device で 31 p - magnetic Resonance Spectroscopy (MRS) determination of を し た. こ の と き, usually radiation に よ る split dead が up こ る と さ れ る に up to 24 time す る か な り before に あ た る 8 time after irradiation で MRS の determination を い each ピ ー ク numerical の strength を determination し た と こ ろ, 20 gy light で は Pi/beta NTPrat IO, PME/beta NTPratio の one of な - move が 観 measuring さ れ た が, between individuals で ば ら つ き が big き く, certain の tendency と し て ま と め る こ と は で き な か っ た. ま た 40 gy after irradiation で も じ with よ う な variations change が 観 measuring さ れ た. こ の phenomenon は interphase die で あ る ア ポ ト ー シ ス に よ る variations change で あ る possibilities と speculation し た が, こ の cell line は radiation susceptibility が comparative low く, ア ポ ト ー シ ス の モ デ ル と し て は inappropriate で あ っ た の で は な い か と え, 続 い て radiation induced 発 ア ポ ト ー シ ス を up こ し や す い こ と が know ら れ て い る ヒ ト leukemia cell origin Molt - 4 を use し て be 験 を line う こ と と し た. こ の Cells を 1 4-trichlorobenzene Gy irradiation し た あ と エ リ ス ロ シ ン B で dyeing し, Die exclusion test で ア ポ ト ー シ ス cells の measuring し た. や く 8 time で 20 ~ 40% が の cells Die ぬ こ と が confirm さ れ た. こ れ は MRS で variations change が 観 measuring さ れ た と nearly い numerical で あ る. 続 い て with cell を マ ウ ス に transplantation し て MRS を determination し よ う と し た が, こ の cell line は ヒ ト origin で あ り, ヌ ー ド マ ウ ス で も transplantation が think う よ う に line か ず, MRS の determination ま で い た ら な か っ た. Future research と の し て は, 単 cells の ま ま MRS を determination す る time を こ ら す か, あ る い は に FM3A cells fight ガ ン tonic な ど の Modulator を and し て ア ポ ト ー シ ス を up こ し や す く す る な ど の way が exam え ら れ, research を 継 続 す る designated で あ る.