培養メサンギウム細胞におけるアポトーシス

1)培養ヒトメサンギウム細胞(HMC)のApoptosisの誘導48時間培養後tumor necrosis factor-α(TNF-α)5000U/mlを加えて24時間培養し、FITC標識d-UTPをterminal deoxynucleotidyl transferaseによりHMCをラベルし蛍光抗体法で観察したところ、d-UTP陽性細胞、即ち、apoptosisを起こしたHMCが確認された。HMCから抽出したDNAをアガロース電気泳動したところDNAのfragmenta-tionも認められた。一方、interferon-γ、interleukin-6、platelet derived growth factor、transforming growth factor-βなどの他のサイトカインや成長因子、高血糖培地ではHMCにapoptosisを誘導することはできなかった。2)TNF-αによるHMCのapoptosisを抑制する因子の検討TNF-αによるHMCのapoptosisは、可溶性TNF-α受容体により抑制された。抑制型サイトカインであるIL-10はTNF-αによるHMCのapoptosisを抑制しなかった。3)薬剤によるHMCのapoptosisDexamethasoneは高濃度でHMCのapoptosisを誘導した。免疫抑制剤サイクロスポリン、FK-506ではapoptosisは誘導されなかった。以上より、i)MCのapoptosisは炎症性サイトカインの一つであるTNF-αで誘導され、その作用は可溶性受容体で制御可能である、ii)Dexamethasoneによるapoptosis誘導は増殖の強い糸球体疾患にステロイドパルス療法が有効である事実に対する根拠となり得ることが考えられた。

1)培養ヒトメサンギウム細胞(HMC)のApoptosisの誘導48時間培養後tumor necrosis factor-α(TNF-α)5000U/mlを加えて24時間培養し、FITC標識d-UTPをterminal deoxynucleotidyl transferaseによりHMCをラベルし蛍光抗体法で観察したところ、d-UTP陽性細胞、即ち、apoptosisを起こしたHMCが確認された。HMCから抽出したDNAをアガロース電気泳動したところDNAのfragmenta-tionも認められた。一方、interferon-γ、interleukin-6、platelet derived growth factor、transforming growth factor-βなどの他のサイトカインや成長因子、高血糖培地ではHMCにapoptosisを誘導することはできなかった。2)TNF-αによるHMCのapoptosisを抑制する因子の検討TNF-αによるHMCのapoptosisは、可溶性TNF-α受容体により抑制された。抑制型サイトカインであるIL-10はTNF-αによるHMCのapoptosisを抑制しなかった。3)薬剤によるHMCのapoptosisDexamethasoneは高濃度でHMCのapoptosisを誘導した。免疫抑制剤サイクロスポリン、FK-506ではapoptosisは誘導されなかった。以上より、i)MCのapoptosisは炎症性サイトカインの一つであるTNF-αで誘導され、その作用は可溶性受容体で制御可能である、ii)Dexamethasoneによるapoptosis誘導は増殖の強い糸球体疾患にステロイドパルス療法が有効である事実に対する根拠となり得ることが考えられた。