抗神経接着分子抗体による神経芽腫のアポトーシス誘導実験

抗神经粘附分子抗体诱导神经母细胞瘤细胞凋亡实验

• 批准号: 08771552
• 负责人: 金井 正樹
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771552/
• 关键词: アポトーシス; 神経芽腫; C1300; N-CAM

1)In vitroにて抗N-CAM抗体作用後の腫瘍細胞増殖の観察10%のbasal mediumを加えたRPMIにて培養したC1300細胞株(cell line N2A)に、抗N-CAMモノクローナル抗体を加え作用させた。コントロールIgG抗体を同様に作用させた細胞株はaggregationを起こしていたのに対し、抗N-CAM抗体を作用させた細胞株では細胞間に隙間を認め、aggregationが抑制されているのが観察された。2)In vivoでの腫瘍細胞増殖の観察1x10^6のC1300腫瘍細胞をA/Jマウスの腹腔内に移植し、第4病日に抗N-CAMモノクローナル抗体を腹腔内投与した(n=20)。コントロールとしてIgG抗体を同様に作用させ、第14病日に腹腔内の腫瘍増殖を観察した(n=20)が、両群とも腹腔内での腫瘍増殖、各臓器への転移を認めなかった。コントロール群においても腹腔内での腫瘍増殖が認められなかったため、移植腫瘍細胞数、および屠殺までの期間などに関し、再度検討する必要がある。3)DNA cleavageの観察1)と同様にして、抗N-CAMモノクローナル抗体を作用させた腫瘍細胞のDNAを抽出し電気泳動を行ったところ、アポトーシスに特有のladder patternが形成された。4)Apoptotic bodyの観察1)と同様にして、抗N-CAMモノクローナル抗体を作用させた腫瘍細胞を電子顕微鏡で観察したところ、apoptotic bodyの形成を認めた。5)結論上記1)3)4)により、in vitroにおいては抗N-CAMモノクローナル抗体は神経芽腫C1300腫瘍細胞のアポトーシスを誘導することが確認された。しかし、臨床に応用させ治療に結びつけるためには、in-vivoにおける証明も必要である。これらは今後の課題と考える。

1)In vitro, anti-N-CAM antibody was added to C1300 cell line (cell line N2A) in basal medium to observe proliferation of tumor cells treated with anti-N-CAM antibody. Anti-NCAM antibodies act on cell lines to inhibit aggregation, and to detect the presence of anti-NCAM antibodies in cell lines. 2)In vivo proliferation of tumor cells was observed. 1x10^6 C1300 tumor cells were transplanted intraperitoneally. Anti-N-CAM antibody was injected intraperitoneally on the 4th day of disease (n=20). The same effect of IgG antibody was observed on the 14th day (n=20), and the same effect was observed on the 14th day (n=20). The number of transplanted tumor cells, the duration of the slaughter, and the need for reexamination are all important. 3)DNA cleavage detection 1) and anti-N-CAM antibody to extract DNA from tumor cells to form a unique ladder pattern 4)1) The formation of apoptotic body was observed by electron microscopy. 5)Conclusion 1)3)4) In vitro, anti-N-CAM antibody can induce apoptosis in C1300 tumor cells. The clinical application of the drug is necessary. This is the first time I've seen a problem.