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前駆体のプロセシングに関与するKu2様プロテアーゼの細胞内局在と活性調節機構

Ku2样蛋白酶参与前体加工的亚细胞定位及活性调控机制

基本信息

批准号：
08780592
负责人：
長浜正己
金额：
$ 0.64万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780592/
关键词：
PACE4 アイソフォームプロセシング前駆体細胞内局在

项目摘要

1,PACE4アイソフォームの細胞内分布前駆体タンパク質のプロセシングプロテアーゼであるPACE4には複数のアイソフォームが存在することが知られている。本研究では、cDNAクローニングにより新しく同定されたアイソフォームであるPACE4Eを中心として、これらのアイソフォームの細胞内局在および分泌動態の違いについての解析を試みた。培養細胞による発現系を用いた解析では、従来から知られていたPACE4Aと同様にPACE4Eも種々の前駆体タンパク質に対してプロセシング活性を示した。しかし、PACE4が細胞外に分泌されるのに対して、PACE4Eはほとんど分泌されることなく細胞内に保持された。また蛍光抗体法による解析では、PACE4A、PACE4Eともに、細胞内では主としてゴルジ/トランスゴルジネットワークに存在していた。このことから、PACE4AとPACE4Eはそれぞれ細胞外または細胞内において異なる生理機能を分担している可能性が示唆された。2,PACE4Eの細胞内保持機構PACE4Eの構造の特徴は、そのC末端に疎水性に富むアミノ酸配列を持つことである。そこで、この領域とPACE4Eの細胞内保持機構との関係を調べるために、PACE4EのC末端欠失ミュータントを作成して培養細胞内にて発現させたところ、PACE4Eは培地中に分泌されるようになった。このことから、PACE4Eの細胞内保持にはC末端領域と膜との相互作用が関与することが示唆された。現在、この相互作用の具体的なメカニズムを解析中である。

1. The intracellular distribution of precursors in PACE4 complex is known to exist in PACE4 complex. In this study, we tried to analyze the intracellular structure of PACE4E in the center and secretion dynamics of PACE4E. Culture of cells in the medium of analysis, to understand the production of PACE4A and PACE 4E species of precursor to the quality of the production of enzyme activity PACE4 is secreted outside the cell and kept inside the cell. In the light of antibody analysis, PACE4A, PACE 4E and PACE 4E are present in cells. The possibility of sharing physiological functions outside the cell and inside the cell was demonstrated. 2. The structural characteristics of PACE 4E, the intracellular retention mechanism, are: water, rich in acid, acid. PACE4E's intracellular maintenance mechanism is regulated by PACE4E's C-terminal deletion mechanism, which is produced in cultured cells. PACE4E is maintained in the cell by C-terminal domain and membrane interaction. Now, the interaction of the concrete